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血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及實(shí)際篩選血清方法

閱讀:1348          發(fā)布時間:2023-7-10

血清的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn):

  1. 內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)為不高于5EU/ml

  2. 總蛋白含量胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,,數(shù)值偏高偏低都會影響實(shí)驗(yàn)的正常進(jìn)行

  3. 血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl

  4. pH。國產(chǎn)血清,、大多高于7.5,,進(jìn)口胎牛血清,,大多低于7.5,,根據(jù)PH的高低可用來初步鑒別血清的來源

  5. 微生物,。包括細(xì)菌、霉菌,、支原體,、噬菌體、各類病原性病毒等,,大多都能清除,。大腸桿菌噬菌體無法過濾,很難徹di 清除,,但對血清質(zhì)量影響不大,。病原性病毒,在國產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在,,是影響國產(chǎn)血清質(zhì)量的重要原因之一


在實(shí)際篩選時,,主要從血清外觀和實(shí)驗(yàn)操作時細(xì)胞的生長狀態(tài)進(jìn)行。

一,、從外觀上:

  1. 顏色:根據(jù)血紅蛋白含量的不同,,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,這個指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,。胎牛血清或多或少總有點(diǎn)溶血,,因?yàn)樘ヅQ迥δ懿睿t細(xì)胞容易破裂,;

  2. 澄清度:高質(zhì)量的胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,,表現(xiàn)為稀薄、清淡,;

  3. 血清沉淀:血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,,對血清質(zhì)量沒有影響,沉淀的產(chǎn)生原因跟加工生產(chǎn)方式,、是否反復(fù)凍融密切相關(guān),,在實(shí)驗(yàn)操作中可能會對細(xì)胞觀察產(chǎn)生影響。

二,、從性能上:

  1. 細(xì)胞形態(tài),,在進(jìn)行血清篩選時首先觀察細(xì)胞的生長形態(tài)是否產(chǎn)生明顯變化,以及觀察貼壁細(xì)胞的貼壁情況,,細(xì)胞在不同血清培養(yǎng)中可能會出現(xiàn)形態(tài)上的差異,;

  2. 倍增時間,一般情況下會選擇倍增時間短的血清,,值得注意的是血清的影響會傳至5代,,在進(jìn)行測試時,,最好培養(yǎng)五代后進(jìn)行計倍增時間的計算;

  3. 克隆形成率,,測試時一般選50,、100、200個細(xì)胞進(jìn)行平板克隆測試,,平均5d左右換一次液,,兩周后染色計數(shù),對比克隆形成情況,。



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