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ELISA檢測結果解讀
閱讀:1469 發(fā)布時間:2023-4-23 ELISA檢測結果可以定量,、定性或半定量地解釋。在定量檢測中,,使用已知標準的連續(xù)稀釋液來生成標準曲線,,通常是光密度(OD)與濃度的關系。由此,,可以計算出未知樣品中目標物的精確數(shù)量,。
標準曲線計算和ELISA實驗中未知物目標濃度測定示例
在定性檢測中,通常仍會通過使用酶標儀來收集數(shù)據(jù),但結果將通過與沒有標準曲線的空白和/或陰性孔的比較來解釋為陽性或陰性,。
半定量檢測也是在不使用連續(xù)稀釋或標準曲線的情況下收集數(shù)據(jù),。然而,包含陰性和陽性標準,,通常是高陽性和低陽性,,有利于相對比較未知樣本井和已知狀態(tài)的樣本孔之間的水平。
通過使用這些標準來監(jiān)測檢測的可重復性,,可以設定一個臨界值,,超過臨界值的結果確定為陽性,低于臨界值的為陰性,。一些檢測方法可能還包括一個“灰區(qū)",。對于數(shù)值落在這個區(qū)域的樣品,建議重新測試或進一步調(diào)查,。
雖然定量檢測在某些情況下可能是可取的,,但在每塊板上包含一條完整的標準曲線會占用寶貴的孔位。因此,,根據(jù)用戶希望從檢測結果中獲得的信息,,存在一種權衡。
像許多檢測方法一樣,,從ELISA獲得的結果很少可能是100%準確的,,假陽性和假陰性結果都有可能。因此,,大多數(shù)測試將與靈敏度和特異性相關,;它們越接近100%,測試就越好,。
有許多因素會影響這些值,,例如:
1、非特異性結合或交叉反應的高背景,;
2,、抗體對其目標親和力差;
3,、非最佳檢測條件,;
4、樣本條件和復雜性,。
因此,,計算靈敏度和特異性的數(shù)值是許多ELISA檢測方法發(fā)展的一個重要步驟,特別是在診斷環(huán)境中,,以確定獲得的任何結果的信息量和可靠性,。