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  在做elisa試劑盒實驗的時候,ELISA吸光值一直在衰減這樣的現(xiàn)象,。在加完顯色液(購買)顯色一定時間后，再加終止液（2M H2SO4,，自己配制）后，立即測試其吸光度值，等過幾分鐘再測試吸光度值,，發(fā)現(xiàn)兩次測得的吸光度值發(fā)生衰減,。第二次均小于次,。并且,，加終止液時,，從條加到第12條后，測試發(fā)現(xiàn),，吸光度值從1-12條逐級衰減,。前提是這12條酶標板都是同一種產(chǎn)品,，并且包被相同蛋白。原來ELISA吸光度值衰減可以這樣巧妙應(yīng)對,。      

  其實具體的原因也很簡單,，有可能是顯色液的質(zhì)量不夠好。一般情況下,，終止反應(yīng)后OD值的下降前期不是很明顯,。終止后，吸光度值是會隨著時間衰減,，所以一般是加完終止液后立即測,，這樣比較準。再次分析12條顯示逐級遞減的原因看看是否是：

1,、 顯色時間調(diào)整,，如果你現(xiàn)在的顯色時間是10MIN，那調(diào)整到30MIN,，再加終止液,觀察上述現(xiàn)象是否出現(xiàn),。    

2、 終止液中加入少量甘油看下怎么樣,。建議您使用RD品牌的ELISA試劑盒,，顯色時間是30分鐘，終止后要求在30分鐘內(nèi)檢測,，加入終止液后,，在加入終止液后2到3分終內(nèi)檢測，這是OD值相對比較高,。擬合值能達到四個9,。