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實(shí)驗(yàn)室科研工作離不開抗體,，WB,、IP、IHC,、IF,、ChIP和FC都需要用到抗體，那科研實(shí)驗(yàn)室如何選擇合適的抗體呢,？

一. 一抗選擇要點(diǎn):

1）.確定抗體的名字,。注意中英文名字,、它名,、亞型等信息。

2）確定你的實(shí)驗(yàn)類型,。Elisa,，WB，IHC,，ICC,，還是FACS。一般抗體的說明書都會(huì)列出該抗體經(jīng)驗(yàn)證過適用于何種實(shí)驗(yàn)的類型,，如果抗體說明書沒有提及的應(yīng)用類型,，并不意味著該抗體不適用于此種分析應(yīng)用類型,，而僅是說明尚未經(jīng)過此種實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，請(qǐng)根據(jù)說明書列出的已驗(yàn)證的類型來選擇適合你實(shí)驗(yàn)的抗體,。

3）.確定實(shí)驗(yàn)樣本的種屬,。Human，Mouse,，還是Rat,。一般抗體說明書都列出該抗體經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證過適用于何種物種實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)根據(jù)說明書列出已驗(yàn)證的種屬來選擇適合你實(shí)驗(yàn)的抗體,。

4）.樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì),。了解樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)有助于選擇最合適的抗體，待測(cè)樣本蛋白的結(jié)構(gòu)域和樣本在提取和處理過程中是否會(huì)變性,，蛋白空間構(gòu)象的改變,，會(huì)影響抗體的免疫親和反應(yīng)。

5）.單多克隆抗體的選擇,。市面上的抗體還是以多克隆抗體為主,，一般單克隆抗體特異性強(qiáng)，但親和力相對(duì)小,，檢測(cè)抗原靈敏度相對(duì)就低;而多克隆抗體特異性稍弱,，但抗體的親和力強(qiáng)，靈敏度高,，但易出現(xiàn)非特異性染色(可以通過封閉等避免),。

二. 二抗選擇要點(diǎn):

1）.種屬來源。主要根據(jù)一抗種屬來源來決定購(gòu)買二抗來源,，如一抗是小鼠來源,，那二抗就買抗小鼠的即可(羊、兔等均可),。

2）.標(biāo)記物的選擇,。有HRP、Biotin,、熒光素等標(biāo)記物,。一般SP三步法二抗選擇Biotin標(biāo)記的二抗，以與后面的SP結(jié)合反應(yīng),，而免疫熒光染色就需要購(gòu)買不同熒光素標(biāo)記的二抗,，如羅丹明、FITC,、Cy3等常用熒光素,。