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這類反應(yīng)的定性結(jié)果可以用肉眼判斷,。目視標(biāo)本也無色或近于無色者判為陰性，顯色清晰者為陽性。但在 ELSIA中,，正常人血清反應(yīng)后常可出現(xiàn)呈色的本底,，此本底的深淺因試劑的組成和實(shí)驗(yàn)的條件不同而異,，因此實(shí)驗(yàn)中必須加測陰性對照。陰性對照的組成應(yīng)為不含受檢物的正常血清或類似物,。在用肉眼判斷結(jié)果時,，更宜用顯色深于陰性對照作為標(biāo)本陽性的指標(biāo)。目視法簡捷明了,，但頗具主觀性,。在條件許可下，應(yīng)該用比色計(jì)測定吸光值,，這樣可以得到客觀的數(shù)據(jù),。先讀出標(biāo)本（sample，S）,、陽性對照（P）,、和陰性對照（N）的吸光值，然后進(jìn)行計(jì)算,。計(jì)算方法有多種,，大致可分為陽性判定值法和標(biāo)本與陰性對照比值法兩類,。

 

1. 陽性判定值

  陽性判定值（cut-off value）一般為陰性對照A值加上一個特定的常數(shù)，以此作為判斷結(jié)果陽性或陰性的標(biāo)準(zhǔn),。

  用此法判斷結(jié)果要求實(shí)驗(yàn)條件十分恒定,，試劑的制備必須標(biāo)準(zhǔn)化，陽性和陰性的對照品應(yīng)符合一定的規(guī)格,，須配用精密的儀器,，并嚴(yán)格按規(guī)定操作。陽性判定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過對大量標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)檢測而得到的?，F(xiàn)舉某種檢測 HBsAg的試劑盒為例,。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復(fù)鈣人血漿，陽性對照品HBsAg的含量標(biāo)明為P=9±2ng /ml,。每次試驗(yàn)設(shè)2個陽性對照和3個陰性對照,。測得A值后，先計(jì)算陰性對照A值的平均數(shù)（NC X ）和陽性對照A值的平均數(shù)（PCX）,，兩個平均數(shù)的差（P-N）必須大于一個特定的數(shù)值（例0.400）,，試驗(yàn)才有效。3個陰性對照A值均應(yīng)≥0.5×NCX,，并≤1.5×NCX,，如其中之一超出此范圍，則棄去,，而已另兩個陰性對照重新計(jì)算NCX,；如有兩個陰性對照A值超出以上范圍，則該次實(shí)驗(yàn)無效,。陽性判定值按下式計(jì)算：

陽性判定值=NCX+0.05 

標(biāo)本 A值＞陽性判定值的為陽性,，小于陽性判定值的為陰性。應(yīng)注意的是,，式中0.05為該試劑盒的常數(shù),，只適合于該特定條件下，而不是對各種試劑均可通用,。 

根據(jù)以上敘述可以看出,，在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到試驗(yàn)的質(zhì)控作用，試劑變質(zhì)和操作不當(dāng)均會產(chǎn)生"試驗(yàn)無效"的后果,。

 

2. 標(biāo)本/陰性對照比值

  在實(shí)驗(yàn)條件（包括試劑）較難保證恒定的情況下,，這種判斷法較為合適。在得出標(biāo)本（ S）和陰性對照（N）的A值后,，計(jì)算S/N值,。也有寫作P/N的，這里的P不代表陽性(positive)，而是病人（patient）的縮寫,，不應(yīng)誤解,。為避免混淆，更宜用S/N表示,。在早期的間接法ELISA中,，有些作者定出S/N為陽性標(biāo)準(zhǔn)，現(xiàn)多為各種測定所沿用,。實(shí)際上每一測定系統(tǒng)應(yīng)該用實(shí)驗(yàn)求出各自的S/N的閾值,。更應(yīng)注意的是，N所代表的陰性對照是不含受檢物質(zhì)的人血清,。有的試劑盒中所設(shè)陰性對照為不含蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)含量較底的緩沖液,，以致反應(yīng)后產(chǎn)生的本底可能較正常人血清的本底低得多。因此,，這類試劑盒規(guī),，如N<0.05（或其他數(shù)值），則按0.05計(jì)算,，否則將出現(xiàn)假陽性結(jié)果。