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    細胞培養(yǎng)是指將細胞從動物或植物體內(nèi)取出,，然后在適宜的人工環(huán)境中生長的過程。細胞可以在培養(yǎng)前直接從組織中取出并通過酶或機械方法進行解離,，也可以來源于已建立的細胞系或細胞株,。細胞常規(guī)培養(yǎng)是在細胞房中進行，在超凈工作臺或生物安全柜中，把細胞處理好,，根據(jù)需要加入細胞培養(yǎng)基,，放入細胞培養(yǎng)瓶/皿或細胞培養(yǎng)板中，再放到帶有5% CO2 的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。細胞培養(yǎng)過程中如果操作不當(dāng)或者條件控制不合適容易受到化學(xué)或者生物因素的污染,，常見的污染源有：

    1.細菌污染 

    細菌污染是實驗室細胞培養(yǎng)中常見的污染，即使在細胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素,，也可能因為操作不慎而引起污染,。常見的有革蘭氏陽性菌，如枯草桿菌以及大腸桿菌,、假單胞菌等革蘭氏陰性菌,，其中又以白色葡萄球菌較常見。 

    培養(yǎng)細胞受細菌污染后,，會出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁,，pH改變。污染后細胞發(fā)生病理改變,，胞內(nèi)顆粒增多,、增粗，后變圓脫落死亡,。 

    2.真菌污染 

    真菌污染是細胞培養(yǎng)過程中常見的一種,，常見的真菌有煙曲霉、黑曲菌,、孔子霉、毛霉菌,、白色念珠菌和酵母菌,。 

    培養(yǎng)細胞受真菌污染后，可見培養(yǎng)液中漂浮著白色或淺黃色的小點,，有的散在生長,，培養(yǎng)液一般不發(fā)生混濁；倒置顯微鏡下可見絲狀,、管狀或樹枝狀的菌絲縱橫交錯在細胞之間或培養(yǎng)基中,，有的呈鏈狀排列。 

   真菌污染后,，細胞生長變慢,，但后由于營養(yǎng)耗盡及毒性作用而使細胞脫落死亡。 

    3.支原體污染 

    支原體是介于細菌與病毒之間能獨立生活的小微生物,，小直徑0.2μm,，一般過濾除菌無法去除它，光鏡下難以看清它的形態(tài)結(jié)構(gòu)。開始不易發(fā)現(xiàn),，能在偏堿條件下生存,，對青霉素有抗藥性。多吸附于細胞表面或散在于細胞之間,。 

    培養(yǎng)細胞受支原體污染后,，部分敏感細胞可見細胞生長增殖變慢，部分細胞變圓,，從瓶壁脫落,。但多數(shù)細胞污染后無明顯變化，或略有變化,，若不及時處理,，還會產(chǎn)生交叉污染。 

    4.病毒污染 

    組織細胞培養(yǎng)過程中,，如果沒有除去潛在的病毒,，就會產(chǎn)生病毒污染。目前,，從原代猴腎細胞的培養(yǎng)中已發(fā)現(xiàn)不少于20種血清性病毒,。 

    盡管病毒污染的細胞不影響原代培養(yǎng)，但疫苗是不安全的,。因此,，潛在病毒是細胞大量和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題,。