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解讀微生物菌種活化方式
閱讀:1386 發(fā)布時(shí)間:2022-6-7菌種活化就是將保藏狀態(tài)的菌種放入適宜的培養(yǎng)基中培養(yǎng),,逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)是為了得到純而壯的培養(yǎng)物,即獲得活力旺盛的,、接種數(shù)量足夠的培養(yǎng)物,。菌種發(fā)酵有一般需要2-3代的復(fù)壯過程,因?yàn)楸4鏁r(shí)的條件往往和培養(yǎng)時(shí)的條件不相同,,所以要活化,讓菌種逐漸適應(yīng)培養(yǎng)環(huán)境,。
要明白菌種活化的情況就需要了解菌種保藏的方式和方法。目前國際國內(nèi)常用的菌種保存方法包括:定期移植法,、液體石蠟法,、沙土管法,、真空冷凍干燥法、80℃冰箱凍結(jié)法,、液氮超低溫凍結(jié)法,。
對(duì)于不同的保存方式活化的方式也不同:
1、定期移植法的菌種復(fù)蘇較簡單,,直接轉(zhuǎn)接即可,;
2、液體石蠟法保存的菌種在復(fù)蘇時(shí),,挑取少量菌體轉(zhuǎn)接在適宜的新鮮培養(yǎng)基上,,生長繁殖后,再重新轉(zhuǎn)接一次,;
3,、沙土管法保存菌種在復(fù)蘇時(shí),在無菌條件下打開沙土管,,取部分沙土粒于適宜的斜面培養(yǎng)基上,,長出菌落后再轉(zhuǎn)接一次?;蛉∩惩亮S谶m宜的液體培養(yǎng)基中,,增殖培養(yǎng)后再轉(zhuǎn)接斜面;
4,、真空冷凍干燥法保存菌種在復(fù)蘇時(shí)先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部,,將安瓿管頂部燒熱,用無菌棉簽沾冷水,,在頂部擦一圈,,頂部出現(xiàn)裂紋,用挫刀或鑷子頸部輕叩一下,,敲下已開裂的安瓿管的頂端,,用無菌水或培養(yǎng)液溶解菌塊,使用無菌吸管移入新鮮培養(yǎng)基上,,進(jìn)行適溫培養(yǎng),;
5、-80℃冰箱凍結(jié)法保存菌種復(fù)蘇時(shí),,從冰箱中取出安瓿管或塑料凍存管,,應(yīng)立即放置38℃-40℃水浴中快速復(fù)蘇并適當(dāng)快速搖動(dòng)。直到內(nèi)部結(jié)冰全部溶解為止,,約需50秒-100秒,。開啟安瓿管或塑料凍存管,將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng);
6,、液氮超低溫凍結(jié)法保存菌種復(fù)蘇與-80℃冰箱凍結(jié)法保存菌種復(fù)蘇相似,,從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管,應(yīng)立即放置在38℃-40℃水浴中快速復(fù)蘇并適當(dāng)搖動(dòng),。直到內(nèi)部結(jié)冰全部溶解為止,,一般約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管,,將內(nèi)容物移至適宜的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),。