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ELISA試劑盒使用技巧大集合
閱讀：921 發(fā)布時(shí)間：2022-5-5ELISA試劑盒使用技巧大集合 ：
1.洗液不夠時(shí)，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液,。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
2.吸取液體時(shí),，要用量程和需要量接近的槍去吸,，減少誤差。
3.要盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),，這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,，又能反映出試劑盒的精密度。
4.為防止樣品蒸發(fā),，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
5.未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,，請(qǐng)于2-8℃保存,。辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標(biāo)記抗人IgG工作液,。
6.加樣后及時(shí)放人孵箱,，標(biāo)本較多時(shí),，要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,，防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*,。
7.顯色劑盡量在臨用前配制,，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用,。
8.加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干,。
9.合理安排檢測(cè)量，以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng),。
10.液體全部加入酶標(biāo)孔后,，將酶標(biāo)板放在桌子上平行輕輕搖晃30s，使液體充分混合均勻,，也使其得到充分的反應(yīng),。
11.作時(shí)必須戴手套，穿工作衣,，嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,。
12.試驗(yàn)結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
13.樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,。
14.剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘，或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄,。
15.不同批號(hào)試劑組分不得混用。16.實(shí)驗(yàn)洗滌時(shí)各孔均需加滿液體,，防止孔口有游離酶不能洗凈,。
16.在使用微量加樣器時(shí)，吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,，即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液,。
17.用于檢測(cè)的樣品應(yīng)保持新鮮。
18.用戶在初次使用試劑盒時(shí),，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,，以便試劑集中到管底。
19.每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,，該孔不加任何試劑,，只是之后加底物溶液及2N H2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零,。
20.要確保微量加樣器的準(zhǔn)確性,，可以使用蒸餾水和電子天平進(jìn)行確定(由于蒸餾水不含雜質(zhì),，溫度環(huán)境為20%左右時(shí)，lmL的水可以看作是lg,、200 L的水可以看作是0.2g)每一把微量加樣器都應(yīng)該將其高量程和低量程進(jìn)行確定,。
21.由于底物顯色劑對(duì)光及其敏感，因此要避光保存,。
22.手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后,。應(yīng)靜置15～30s，不要將一個(gè)酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,，防止交叉污染,。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。
23.檢測(cè)吸光度前應(yīng)將酶標(biāo)儀打開,，將其預(yù)熱30min以上,。
24.底物為TMB，避免與皮膚相接觸,。終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,，應(yīng)盡量避免接觸皮膚。
25.孵育的時(shí)間應(yīng)該嚴(yán)格按照試劑盒說明書上的時(shí)間為準(zhǔn),。
26.對(duì)樣本的結(jié)果有疑問時(shí)需要使用其他檢測(cè)方法進(jìn)行驗(yàn)證,。
27.沒有去離子水或雙蒸水時(shí)，可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,，切勿使用自來水,。
28.實(shí)驗(yàn)前30min將試劑盒中的所有試劑從冰箱取出，使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同,，酶標(biāo)板只要取出所需量,。
29.吸取液體時(shí)速度不易太快，以免產(chǎn)生氣泡,，吸取的量不夠準(zhǔn)確,。吸取液體時(shí)要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸，減少誤差,。
30.將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孑L壁接觸,，液滴會(huì)自然流下去,。吸入液體時(shí)的方法是吸兩檔打一檔，防止由于槍頭的毛細(xì)作用使得部分液體不能流出而造成的誤差,。