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培養(yǎng)凍存的細(xì)胞具體過程
閱讀:1419 發(fā)布時間:2021-10-8培養(yǎng)凍存的細(xì)胞具體過程:
(1) 將一管細(xì)胞從液氮罐中取出,,注意保護(hù)手和眼睛,。
(2) 將凍存管快速的放入37℃水浴中,,輕輕握住并旋轉(zhuǎn),,直到管內(nèi)物體*融化,。
(3) 將凍存管立即從水浴中拿出,擦干,,轉(zhuǎn)入無菌環(huán)境,。
(4) 用70%的酒精沖洗凍存管,然后擦去多余酒精,。
(5) 打開蓋子,,注意手指不要碰到里面的螺紋(注意,由于凍存管有負(fù)壓,,開蓋時可能會有少量溢出,,這是正常現(xiàn)象),。
(6) 用多聚賴氨酸(或參照說明書)包被培養(yǎng)瓶,。多數(shù)細(xì)胞推薦的接種密度為每平方厘米5000個細(xì)胞。
(7) 蓋好培養(yǎng)瓶的蓋子,,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞分布均勻,。若需要氣體交換可打開蓋子。
(8) 將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中(37℃,,5%CO2,,95%空氣)
(9) 放入培養(yǎng)箱后第6-16小時更換一次培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細(xì)胞,。