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技術(shù)文章

培養(yǎng)凍存的細(xì)胞具體過程

閱讀:1514          發(fā)布時間:2021-10-8

培養(yǎng)凍存的細(xì)胞具體過程:

(1) 將一管細(xì)胞從液氮罐中取出,,注意保護(hù)手和眼睛,。

(2) 將凍存管快速的放入37℃水浴中,,輕輕握住并旋轉(zhuǎn),,直到管內(nèi)物體*融化。

(3) 將凍存管立即從水浴中拿出,,擦干,轉(zhuǎn)入無菌環(huán)境。

(4) 用70%的酒精沖洗凍存管,,然后擦去多余酒精,。

(5) 打開蓋子,注意手指不要碰到里面的螺紋(注意,,由于凍存管有負(fù)壓,,開蓋時可能會有少量溢出,這是正?,F(xiàn)象),。

(6) 用多聚賴氨酸(或參照說明書)包被培養(yǎng)瓶。多數(shù)細(xì)胞推薦的接種密度為每平方厘米5000個細(xì)胞,。

(7) 蓋好培養(yǎng)瓶的蓋子,,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞分布均勻。若需要氣體交換可打開蓋子,。

(8) 將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中(37℃,,5%CO2,95%空氣)

(9) 放入培養(yǎng)箱后第6-16小時更換一次培養(yǎng)基,,以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細(xì)胞,。



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