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標(biāo)本對(duì)ELISA試劑盒檢測(cè)的影響說明
閱讀：1253 發(fā)布時(shí)間：2021-6-9ELISA試劑盒即酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),，是一種常用的固相酶免疫測(cè)定方法,。 由于ELISA方法靈敏
,，特異性強(qiáng)不需要特殊設(shè)備，所以被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定,。但ELISA測(cè)定中影響因
素較多,，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在臨床檢驗(yàn)中除正常反應(yīng)外,，有時(shí)?？梢姷揭恍╁e(cuò)
誤結(jié)果（即假陽性或假陰性）；本司在這里為大家解讀下ELISA試劑盒檢測(cè)的影響因素中標(biāo)本
的影響,。
1. 溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清采用ELISA法檢測(cè)易產(chǎn)生假陽性,。可能是溶血血清中含有過
氧化酶物質(zhì)（紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素）,，在洗滌過程中往往難以*洗脫,，它可使
H2O2釋放出原生態(tài)氧（O），從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì),，即顯藍(lán)色,，
產(chǎn)生假陽性［2］。所以嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用,。
2. 標(biāo)本受細(xì)菌污染。因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,，因此,，被細(xì)菌污染的標(biāo)本同
溶血標(biāo)本一樣,，亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測(cè)定結(jié)果。
3. 標(biāo)本保存不當(dāng),。在冰箱中保存過久的標(biāo)本,，在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過深、造成
假陽性,；為克服上述干擾,，ELISA試劑盒測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集；如不能立即測(cè)定,，5 d
內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4℃,，1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存；凍存后融解的標(biāo)本,，蛋白
質(zhì)局部濃縮,，分布不均，應(yīng)充分混合后再測(cè)定,，但混勻時(shí)應(yīng)輕柔,，不可強(qiáng)烈振蕩。
4. 塑料試管能吸附抗原物質(zhì),，樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性,。
好使用真空采血管；并使用非抗凝標(biāo)本,，肝素抗凝血漿會(huì)增加OD值,，EDTA、酶抑制劑（如NaN3
）可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性,。
5. 標(biāo)本凝固不全,。 在工作中，有時(shí)為了爭取時(shí)間快速檢測(cè),，常在血液還未開始凝固時(shí)即強(qiáng)
行離心分離血清,，使血清中仍殘留部分纖維蛋白原，在ELISA測(cè)定過程中可以形成肉眼可見的
纖維蛋白塊,，易造成假陽性結(jié)果,；因此血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。