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轉(zhuǎn)基因探針法PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)與注意事項(xiàng)
閱讀:1676 發(fā)布時(shí)間:2021-1-6轉(zhuǎn)基因探針法PCR試劑盒實(shí)驗(yàn)及效果:
在無內(nèi)毒素試管中,加入100 uL細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水,、內(nèi)毒素標(biāo)準(zhǔn)溶液,或待測(cè)樣品。再加入100 uL鱟試劑溶液,混勻,37ºC溫育T1分鐘,。溫育結(jié)束,加入100 uL顯色基質(zhì)溶液,混勻,37ºC溫育T2分鐘,。溫育結(jié)束,加入500 uL偶氮化試劑1溶液,混勻,加入500uL偶氮化試劑2溶液,混勻加入500 uL偶氮化試劑3溶液,混勻,靜置5分鐘,于545nm波長(zhǎng)處讀取吸光度值。
轉(zhuǎn)基因探針法PCR試劑盒需要自備的器材:
1.儀器:分析天平,、離心機(jī),、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器,、-20 ℃冰箱,、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL,、200 µL,、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管,、眼科剪,、眼科鑷、生理鹽水,、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管,、吸頭(10 µL、200 µL,、1000 µL),、滅菌雙蒸水。
轉(zhuǎn)基因探針法PCR試劑盒注意事項(xiàng):
1.基礎(chǔ)程序,;
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度,;
3.反應(yīng)時(shí)間;
4.循環(huán)次數(shù),;
5.PCR 反應(yīng)液的配制,;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué),;
8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。