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elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)前樣本的處理方法您知多少

閱讀:1340          發(fā)布時(shí)間:2020-6-30

elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)前樣本的處理方法您知多少,?它的每一步都需要大家謹(jǐn)慎小心,。在收集樣本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,,必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定,。對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的樣本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?。?duì)于隔天再檢測(cè)的樣本,,及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的,,-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。 液體類標(biāo)本: 包括血清,、血漿,、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清等,。

 1. 血清 
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。

2. 血漿 
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。

3. 細(xì)胞培養(yǎng)上清 
 檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。

4 尿液 
用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行elisa試劑盒,。
 
5. 組織標(biāo)本
 切割標(biāo)本后,,稱取重量。加入一定量的PBS,,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4),,或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。 

6. 培養(yǎng)細(xì)胞
 檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。
 
 

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