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技術(shù)文章

IL-4 ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)用途

閱讀:1343          發(fā)布時(shí)間:2020-1-3

IL-4 ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)用途:IL-4,,白介素-4,。IL-4由活化T細(xì)胞、肥大細(xì)胞和中性粒細(xì)胞產(chǎn)生,。IL-4首先被發(fā)現(xiàn)對(duì)骨髓來(lái)源的T細(xì)胞有生長(zhǎng)促進(jìn)作用,。此后,發(fā)現(xiàn)IL-4的作用譜越來(lái)越廣,,包括對(duì)T,、B細(xì)胞、肥大細(xì)胞,、NK細(xì)胞,、LAK細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞都有直接的促進(jìn)生長(zhǎng)和分化作用,。作用通過(guò)細(xì)胞膜上的IL-4受體而實(shí)現(xiàn)。

所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒(ELISA),。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體,。檢測(cè)相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)生物素(biotin)標(biāo)記,。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,,PBS或TBS洗滌。隨后加入過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng),;經(jīng)過(guò)PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色,。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的待測(cè)因子呈正相關(guān),。

IL-4 ELISA試劑盒技術(shù)原理:

(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。

(2). 結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,。

(3). 酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,,又保留酶的活性。

(4). 受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng),。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,,也通過(guò)反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。

(5). 此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例,。

(6). 加入酶反應(yīng)的底物后,,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),,故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析,。測(cè)定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好,。以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),,將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。

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