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                         P27蛋白試劑盒操作流程 

秋天到了，果子熟了,。黃澄澄的是梨，紅通通的是萍果,，亮晶晶的是葡萄,。一陣涼風(fēng)吹來，果兒點頭,，散發(fā)出誘人的香味兒,。接下來介紹 P27蛋白試劑盒操作流程 。

操作程序：

1. 棄去液體,，甩干,，每孔加滿稀釋后洗滌液，振蕩30秒,，甩去洗滌液,，用吸水紙拍干。如此重復(fù)5次,，拍干,。

2. 每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘,。。

3. 取出酶標(biāo)板,，每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

4.測定：以空白孔調(diào)零,，在450nm波長下測量各孔的吸光度值（OD值）,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

5.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對應(yīng)的OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,，再根據(jù)樣品的OD值在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度,。也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算,。應(yīng)記住由于樣品稀釋了的,，其實際濃度應(yīng)該乘以總稀釋倍數(shù)。

試劑盒組成 

1 30倍濃縮洗滌液 20ml×1瓶 7 終止液 6ml×1瓶

2 酶標(biāo)試劑 6ml×1瓶 8 標(biāo)準(zhǔn)品（16ng/L） 0.5ml×1瓶

3 酶標(biāo)包被板 12孔×8條 9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1瓶

4 樣品稀釋液 6ml×1瓶 10 說明書 1份

5 顯色劑A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2張 

6 顯色劑B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1個

樣本處理及要求

1. 血清：全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,，取上清即可檢測,，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。

2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑,，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。

3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測,，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。