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技術(shù)文章

兔ELISA試劑盒操作及保存方法

閱讀:1001          發(fā)布時間:2019-7-25

                   兔ELISA試劑盒操作及保存方法

 在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定,。對收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的樣本,及時儲存在4℃?zhèn)溆?。對于隔天再檢測的樣本,,及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的,,-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融,。

保存方法:

  1、血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。

 

  2、血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。

 

  3,、細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。

 

  4,、組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,,稱取重量。加入一定量的PBS,,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4),,或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用,。

 操作注意事,;

 

  1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。

 

  2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果,。

 

  3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣,。

 

  4.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

 

  5.封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。

 

  6.底物請避光保存。

 

  7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

 

  8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

 

  9.本試劑不同批號組分不得混用,。

 

  10,、如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)

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