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上海撫生ELISA流程的說明
閱讀：1285 發(fā)布時間：2019-7-5
上海撫生ELISA流程的說明
上海撫生物科技有限公司是一家專注于生物的技術企業(yè),，主要從事免疫學,、分子生物學和常規(guī)生化試劑的,、銷售,。并代理銷售,，致力于為廣大高校,、科研院所和企事業(yè)單位提供的科研試劑和完善的技術服務，滿足生物化學,、分子生物學 ,、細胞生物學、免疫學 ELISA試劑盒等生物科技實驗需求,。目前很多客戶因為對品牌的信任度問題,，公司仍然是一個非常好的選擇上海撫生ELISA試劑盒，是 你不二的選擇,。
剩余的試劑盒材料要妥善保存
標準品分裝后按說明書要求的溫度保存,，這樣可以避免污染，對要求冷凍保存的標準品還可以避免反復凍融,；酶標板放回錫箔紙袋,，加入干燥劑，封緊封口,，4℃保存,。忌未將酶標板*平衡至室溫，就放回錫箔紙袋,，因為此時由于溫度差,，酶標板上會有水汽，不利于穩(wěn)定保存,。
加樣要快速準確,，避免氣泡
加樣時間宜控制在 15 分鐘內(nèi)。加樣前要將樣本混勻，特別是凍存后融化的樣本（自然融化的血清等樣本會有分層現(xiàn)象）,，應上下顛倒充分混勻,，注意動作輕緩，避免產(chǎn)生氣泡,。如凍存融化后的樣本有沉淀,，可以再次離心。整個加樣過程都要注意避免產(chǎn)生氣泡,。氣泡會影響蛋白的相互結合,，而影響反應進行。
孵育時要保證溫度均勻,，防止揮發(fā)變干
孵育時壓緊封口膜,。多塊板一起實驗時，要平放各板,，不要疊放,，以免因溫度不均造成漂移或邊緣效應。
洗板機的應用
使用洗板機,，不但可以降低勞動強度,，而且有利于保證 ELISA 測試的穩(wěn)定性。目前的全自動洗板機不但具有很多實用的洗滌動作,，如底部沖洗,，兩點吸液，震動,，交叉吸液,；還可以根據(jù)需要調(diào)節(jié)沖洗壓力，沖洗距離,，沖洗時間等參數(shù),。通過優(yōu)選這些動作和參數(shù)，能保證良好的洗滌效果,。洗板機的性能對于結果準確性影響也很大,，好的洗板機要保證洗板后的殘留液盡可能的少，一般不超過 2μL,，以洗滌后用人工拍板墊紙不濕為準,。應定期檢查抽吸針頭是否堵塞。洗液如果含有吐溫,，應隨用隨配。
手動洗板的操作指南
加洗液要快速,，沒有多道移液器可以使用洗瓶,。洗液應新鮮配制，以免被其他試劑污染，或染菌,。加好洗液后浸泡 30s-1min,。甩板倒液要迅速干脆。倒液后在吸水紙上拍板,，選用無粉塵和碎屑的吸水紙,。需要用力拍板，使孔內(nèi)沒有可見液體掛壁,；但也不能太重,，不能讓樣品干太久。酶標板拍干后立即做后續(xù)的加液,。
顯色反應的關鍵點
ELISA 實驗是個酶促底物顯色反應,，隨時間增加，顯色變深,，所以選擇*佳時間終止反應是得到準確的標準的曲線和樣本濃度的重要因素,。終止過程要*。使用的 TMB 底物時*終止點是黃色,，不會有任何程度的藍色或綠色,，終止過程中必要時可以震蕩 96 孔板，或用槍頭抽吸混勻（終止液含強酸,，避免腐蝕）,。
數(shù)據(jù)分析
按照說明書推薦的數(shù)據(jù)分析方法做曲線擬合及分析。說明書中的標準曲線是在的實驗室中,，由非常有經(jīng)驗的操作人員得到的結果,。客戶的標準曲線和說明書中的標準曲線可能存在不同,，但不等于不好,。通常判斷標準曲線合格的標準為：：背景OD 值 <0.2；點 OD 值>1.0,；相關系數(shù) R2 接近或等于 1,。只要滿足這些條件的標準曲線都是可以使用的。