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                                               大鼠ELISA試劑盒實驗要求及注意事項

【操作步驟】

標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支,，依次進行稀釋數(shù)倍,。

加樣：分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同),、標準孔,、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,。

溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

配液：將30倍(48T 的20 倍)濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去,，如此重復5次，拍干,。

加酶：每孔加入酶標試劑50μl,，空白孔除外。

溫育：操作同3,。

洗滌：操作同5,。

顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色10分鐘.

終止：每孔加終止液50μl，終止反應(此時藍色立轉黃色),。

測定：以空白空調零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行,。

 

【注意事項】

1,、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完,，板條應裝入密封袋中保存,。

2、濃洗滌液可能會有結晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結果。

3,、各步加樣均應使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在5分鐘內,，如標本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣。

4,、請每次測定的同時做標準曲線,，做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔一孔的OD值),，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,，計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5,、封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染。

6,、底物請避光保存,。

7、嚴格按照說明書的操作進行,，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8,、所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。

9,、本試劑不同批號組分不得混用。