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大鼠ELISA檢測試劑盒操作要求及注明
閱讀:1178 發(fā)布時間:2019-4-9大鼠ELISA檢測試劑盒操作要求:
包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清等,。
1)血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。
2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。
3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。胸腹水,、腦脊液參照此實行,。
4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/ 分),。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,,以使細(xì)胞破壞并 放出細(xì)胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。
5)組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,,稱取重量,。加入一定量的PBS,PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測,,其余冷凍備用。
大鼠ELISA檢測試劑盒嚴(yán)格注明:
1. 用戶在初次使用試劑盒時,,應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,,以便試劑集中到管底。
2. 每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,,該孔不加任何試劑,,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零,。
3. 為防止樣品蒸發(fā),,試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
4. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,,請于2-8℃保存,。標(biāo)準(zhǔn)品、生物素標(biāo)記抗體工作液,、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液請依據(jù)所需的量配置使用,。請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、生物素標(biāo)記抗體工作液或,、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液,。
5. 建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,。