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兔核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒  注意事項(xiàng)

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,，酶標(biāo)包被板開封后如未

用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,，以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時間

控制在5 分鐘內(nèi),，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣,。

4． 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD 值

大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD 值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定,，計

算時請Zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。

6．底物請避光保存。

7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用,。  

兔核因子κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)ELISA試劑盒   實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中兔核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)水平,。用純化的兔核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)抗體包被微孔板,，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65),，再與HRP 標(biāo)記的核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)抗體結(jié)合,，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色,。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值）,，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中兔核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κB p65)濃度。