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折疊操作程序

(1) 根據(jù)試驗(yàn)要求,，制備枯草桿菌黑色變種芽孢懸液和菌片。菌片放入雙層聚乙烯塑料袋內(nèi)密封包裝,，每袋2片,。每次試驗(yàn)用20袋。

(2) 將滅菌器上,、中,、下3層，每層內(nèi)、中,、外各設(shè)一點(diǎn),，共設(shè)9點(diǎn)。每點(diǎn)物品中間布放1袋,，共需18袋試驗(yàn)菌片,。另將一袋(2片)菌片放置在室溫條件下作為陽性對照。

(3) 按使用說明書所規(guī)定的環(huán)氧乙烷濃度,、作用時間,、柜內(nèi)的溫度和相對濕度，在滿載條件下進(jìn)行環(huán)氧乙烷滅菌處理,。滿載用物品,，隨滅菌器用途而定。處理完畢,，取出菌片,，分別移種于5 ml 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，置37℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),，7d后觀察終結(jié)果(定性培養(yǎng)檢測),。

對難以判斷結(jié)果的營養(yǎng)肉湯管，取其中0.2ml懸液接種營養(yǎng)瓊脂平板,，用無菌L棒涂抹均勻,，置37℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。48h后涂片染色,，顯微鏡下觀察菌落形態(tài),，或進(jìn)一步做其他試驗(yàn)，判斷有無生長或生長的是否為試驗(yàn)菌,。若為非試驗(yàn)菌,，則應(yīng)重新進(jìn)行試驗(yàn)。

(4) 測試中,，應(yīng)同時設(shè)立定性和定量陽性對照組與陰性對照組,。

(5) 定量陽性對照組，以同批試驗(yàn)用菌片置室溫下,，待消毒或滅菌試驗(yàn)組達(dá)規(guī)定作用時間后,，立即將該菌片2片分別放入含5.0mlPBS試管中，各振敲打80次,。取洗液按2.1.1.3 所示方法進(jìn)行活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù),。

(6) 定性陽性對照組，以同批試驗(yàn)用菌片置室溫下,，待滅菌試驗(yàn)組達(dá)規(guī)定作用時間后,，立即將該菌片2 片,，分別接種于5.0ml 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，放入溫箱中作定性培養(yǎng),，觀察有細(xì)菌生長情況,。

(7) 陰性對照組，以同批次試驗(yàn)用未染菌樣片2 片,，分別接種于5.0ml 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基,，同時將未接種過的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中作定性培養(yǎng)，觀察有無細(xì)菌生長,。