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反相液相色譜柱過程中注意事項

1,、新c18反相液相色譜柱在使用前，須先用甲醇或乙腈試劑以20倍柱體積低流速沖洗,，作用是使固定相能充分潤濕,、碳鏈?zhǔn)嬲?，使色譜柱的性能達(dá)到狀態(tài),。具體操作是,，將配制好65%的乙腈/水沖洗后，把色譜柱進(jìn)口端連接在色譜儀上,，出口端放空（不可連上檢測器,，以免污染了檢測器），以0.1ml/min~0.5ml/min的低流速將色譜柱中的清稀溶液吹干,，過20分鐘后再接上檢測器,，以1.0ml/min的流速，繼續(xù)沖洗2~8小時,；

2,、反相液相色譜柱檢測分析樣品完畢后，須沖洗色譜柱,。尤其是流動相中含有酸或鹽時,，需將色譜柱中的酸或鹽沖洗干凈，通常建議用10%甲醇水沖洗20倍柱體積,；

3,、若c18反相液相色譜柱處于長期閑置狀態(tài)時,，要將色譜柱*沖洗,，建議沖洗3-4小時以上,，zui后保存在純有機(jī)試劑或高比例的有機(jī)試劑溶液（如90%甲醇水）中；

4,、由于反相液相色譜柱的固定相疏水性較強(qiáng),，在使用過程中盡量不要使用高水相條件，若水相比例過高易引起固定相疏水塌陷,，引起柱效迅速下降,，甚至造成不可逆的負(fù)面影響；由于碳載量高,，表現(xiàn)尤為明顯,，建議使用過程中水相比例不超過90%；

5,、c18反相液相色譜柱壓力升高,、柱性能下降：通常為色譜柱被污染，對色譜柱進(jìn)行再生處理可恢復(fù)部分柱效,；  

6,、反相液相色譜柱壓力驟升：通常由鹽析出或篩板堵塞引起，若是鹽析出,，用10%甲醇水低流速沖洗至壓力恢復(fù)即可,；若判斷并非鹽析出，以純甲醇或10%甲醇水為流動相反沖色譜柱（將色譜柱反接,，不接檢測器）,，若反沖半小時仍無效果則說明反沖無效，需尋找其他原因,。