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反相液相色譜柱過程中注意事項(xiàng)

1,、新c18反相液相色譜柱在使用前,，須先用甲醇或乙腈試劑以20倍柱體積低流速?zèng)_洗,，作用是使固定相能充分潤(rùn)濕、碳鏈?zhǔn)嬲?,，使色譜柱的性能達(dá)到狀態(tài),。具體操作是，將配制好65%的乙腈/水沖洗后,，把色譜柱進(jìn)口端連接在色譜儀上,，出口端放空（不可連上檢測(cè)器，以免污染了檢測(cè)器）,，以0.1ml/min~0.5ml/min的低流速將色譜柱中的清稀溶液吹干,，過20分鐘后再接上檢測(cè)器，以1.0ml/min的流速,，繼續(xù)沖洗2~8小時(shí),；

2、反相液相色譜柱檢測(cè)分析樣品完畢后,，須沖洗色譜柱,。尤其是流動(dòng)相中含有酸或鹽時(shí),，需將色譜柱中的酸或鹽沖洗干凈，通常建議用10%甲醇水沖洗20倍柱體積,；

3,、若c18反相液相色譜柱處于長(zhǎng)期閑置狀態(tài)時(shí)，要將色譜柱*沖洗,，建議沖洗3-4小時(shí)以上,，zui后保存在純有機(jī)試劑或高比例的有機(jī)試劑溶液（如90%甲醇水）中；

4,、由于反相液相色譜柱的固定相疏水性較強(qiáng),，在使用過程中盡量不要使用高水相條件，若水相比例過高易引起固定相疏水塌陷,，引起柱效迅速下降，甚至造成不可逆的負(fù)面影響,；由于碳載量高,，表現(xiàn)尤為明顯，建議使用過程中水相比例不超過90%,；

5,、c18反相液相色譜柱壓力升高、柱性能下降：通常為色譜柱被污染,，對(duì)色譜柱進(jìn)行再生處理可恢復(fù)部分柱效,；  

6、反相液相色譜柱壓力驟升：通常由鹽析出或篩板堵塞引起,，若是鹽析出,，用10%甲醇水低流速?zèng)_洗至壓力恢復(fù)即可；若判斷并非鹽析出,，以純甲醇或10%甲醇水為流動(dòng)相反沖色譜柱（將色譜柱反接,，不接檢測(cè)器），若反沖半小時(shí)仍無效果則說明反沖無效,，需尋找其他原因,。