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中級(jí)會(huì)員 | 第8年

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PCR儀的實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)

時(shí)間:2023/2/20閱讀:1478
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PCR儀可應(yīng)用在多個(gè)領(lǐng)域,,食品安全,、水產(chǎn)養(yǎng)殖病害、寵物傳染病、植物病害,、科研等,,如食品工業(yè)鏈條中食品安全生物因素的檢測(cè),對(duì)致病微生物檢測(cè),、轉(zhuǎn)基因原料鑒別,、摻假摻雜鑒別等。
實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng):
1.戴一次性手套,,若不小心濺上反應(yīng)液,,立即更換手套;
2.使用一次性吸頭,,嚴(yán)禁與PCR產(chǎn)物分析室的吸頭混用,,吸頭不要長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中,避免氣溶膠的污染,;
3.避免反應(yīng)液飛濺,,打開反應(yīng)管時(shí)為避免此種情況,開蓋前稍離心收集液體于管底,。若不小心濺到手套或桌面上,,應(yīng)立刻更換手套并用稀酸擦拭桌面;
4.操作多份樣品時(shí),,制備反應(yīng)混合液,,先將dNTP、緩沖液,、引物和酶混合好,,然后分裝,這樣即可以減少操作,,避免污染,,又可以增加反應(yīng)的精確度;
5.最后加入反應(yīng)模板,,加入后蓋緊反應(yīng)管,;
6.操作時(shí)設(shè)立陰陽(yáng)性對(duì)照和空白對(duì)照,即可驗(yàn)證PCR反應(yīng)的可靠性,,又可以協(xié)助判斷擴(kuò)增系統(tǒng)的可信性,;
7.盡可能用可替換或可高壓處理的加樣器,由于加樣器最容易受產(chǎn)物氣溶膠或標(biāo)本DNA的污染,,最好使用可替換或高壓處理的加樣器,。
如沒(méi)有這種特殊的加樣器,至少PCR操作過(guò)程中加樣器應(yīng)該專用,,不能交叉使用,,尤其是PCR產(chǎn)物分析所用加樣器不能拿到其它兩個(gè)區(qū);
8.重復(fù)實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證結(jié)果,,慎下結(jié)論,。

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