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CRD0無血清無DMSO細胞凍存液新品上市啦！
細胞凍存是細胞培養(yǎng)技術(shù)中細胞進行保種并長期保存的常用方法,，其中細胞凍存液,，作為細胞凍存時必須使用的一種溶液，不僅僅是說只是用來進行細胞的保存,，在細胞的購買,、寄贈、交換和運送過程中也起著關(guān)鍵作用,，因此選擇一款好的細胞凍存液就尤為重要,。
細胞凍存要取得好的效果，多采用血清,、甘油或二甲基亞砜(DMSO)等作為保護劑,，最大限度的保存細胞活力。這些物質(zhì)有些能提高細胞膜對水的通透性,，在緩慢冷凍過程中可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,，減少細胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷,。同時,，有些保護劑在細胞外也能減輕溶液中高濃度溶質(zhì)對細胞的損傷,，進一步避免細胞在冷凍和復(fù)蘇過程中受到損傷。滲透性保護劑DMSO和非滲透性保護劑血清（主要含白蛋白）是使用最為廣泛,，效果最為穩(wěn)定可靠的,。
此外，采用“慢凍快融”的方法能較好地保證細胞存活,。標(biāo)準(zhǔn)冷凍速度開始為-1到-2℃/分鐘,，當(dāng)溫度低于-25℃時可加速，到-80℃之后可直接投入液氮內(nèi)(-196℃),。復(fù)蘇細胞采用快速融化的方法,，這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成損傷,。
現(xiàn)有凍存方法存在的問題：
1,、DMSO對細胞存在一定的毒性，用量受到限制,，降低或者不使用DMSO,，尋找其它替代物是比較好選擇。
2,、血清,，即使是純化得到的白蛋白，由于其動物來源的特性,，會極大增加帶來病毒等感染物質(zhì)的可能,。而且，血清來源受限,，價格昂貴,，所以其使用也必然會受到越來越多的限制。因此,，尋找替代血清的非滲透性保護劑也顯得尤為必要,。
3、目前,，成熟和穩(wěn)定的凍存細胞技術(shù)是將加有保護劑的細胞懸液置于-196℃液氮中,，這樣可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而保持細胞的特性，在需要的時候經(jīng)過復(fù)蘇程序,，使得細胞重新生長增殖以用于實驗,。細胞儲存在-196℃液氮中，理論上儲存時間是無限的,，但是液氮凍存步驟繁瑣,，需要經(jīng)過程序降溫，如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘,，然后移至-20℃冰箱30分鐘,，再移至-80℃冰箱保存16-18個小時(或隔夜),，最后才移至液氮罐中進行長期的儲存,。(其中需要注意的是-20℃條件下不可超過1個小時,，以防止冰晶過大，造成細胞大量的死亡,。)
賽爾瑞成科學(xué)家團隊在細胞凍存領(lǐng)域進行了大量研究工作,，分別于2015年研發(fā)了 “Cellregen無血清細胞凍存液”（貨號：CF0101） 和2020年研發(fā)了 “無血清低DMSO細胞凍存液”（貨號：CF0201；申請?zhí)枺?02010307890.6）,。這兩款凍存液均是不含血清,，含DMSO，非程序降溫,、可-80℃長期冷凍保存的通用型細胞凍存液 ,，區(qū)別在于“Cellregen無血清細胞凍存液”(貨號：CF0101)的DMSO含量為10%， “無血清低DMSO細胞凍存液”(貨號：CF0201)DMSO的含量為5%(與傳統(tǒng)細胞凍存液的對比可參考附表) ,，產(chǎn)品均獲得了廣大科研工作者的喜愛,。
“Cellregen無血清細胞凍存液”（貨號：CF0101）鏈接
鑒于某些類型的細胞對DMSO敏感，使用含DMSO的細胞凍存液可能會影響細胞的功能,，賽爾瑞成繼續(xù)研究工作,，開發(fā)出一款無血清、無DMSO,、無毒性,、非程序降溫、-80℃可長期冷凍保存的凍存液體系：CRD0無血清無DMSO細胞凍存液（貨號：CF0301）,。
產(chǎn)品特點：
☆ 高安全性,，不含血清及動物源成分，病毒,、霉菌和支原體等污染可能性低,，各批產(chǎn)品之間有更高的產(chǎn)品質(zhì)量一致性。
☆ 無DMSO,，對細胞無潛在的毒性作用,。
☆ 細胞存活率高，無批次差異,。
☆ *凍存液配方,，可直接使用，方便簡捷,。
☆ 可直接存放于-80℃冰箱凍存,，無需經(jīng)過費時的程序降溫過程(省時、省力,、省錢),，不需要采用程序降溫儀,，更不需要放置在-196℃液氮。
☆ 可原位凍存,，比如雜交瘤細胞的亞克隆,，可以大規(guī)模減少工作量，避免污染,。
CRD0無血清無DMSO細胞凍存液凍存效果：
圖1. 3T3細胞復(fù)蘇后細胞狀態(tài)圖
3T3細胞存活率>90%
圖2. ATDC5細胞復(fù)蘇后細胞狀態(tài)圖
ATDC5存活率>90%
圖3 小鼠脾臟T細胞復(fù)蘇后細胞凋亡圖
三個批次復(fù)蘇率均>95%,，且批次間凍存效果無明顯差異
附表：通用細胞凍存液，CRD10無血清細胞凍存液,、CRD5無血清低DMSO細胞凍存液,，CRD0無血清無DMSO細胞凍存液的比較
| 通用細胞凍存液 | CRD10無血清 細胞凍存液 | CRD5無血清低DMSO 細胞凍存液 | CRD0無血清無DMSO 細胞凍存液 | |
| 主要成份 | 含血清， 含DMSO | 不含血清,， 含 DMSO 10% | 不含血清,， 低DMSO 5% | 不含血清， 不含DMSO |
| 細胞毒性 | 高 | 高 | 低 | 無 |
| 安全性 | 低 動物來源病毒,、霉菌和支原體等污染的風(fēng)險偏高 | 高 無動物來源病毒,、霉菌和支原體等污染的風(fēng)險 | 高 無動物來源病毒、霉菌和支原體等污染的風(fēng)險 | 高 無動物來源病毒,、霉菌和支原體等污染的風(fēng)險 |
| 凍存細胞種類 | 適合含血清細胞凍存 | 通用型 適合各類細胞凍存 | 通用型 適合各類細胞凍存 | 通用型 適合各類細胞凍存 |
| 無血清培養(yǎng)細胞生長狀態(tài) | 易改變易由懸浮狀態(tài)回復(fù)貼壁狀態(tài) | 保持懸浮培養(yǎng)狀態(tài) | 保持懸浮培養(yǎng)狀態(tài) | 保持懸浮培養(yǎng)狀態(tài) |
| 批次差異 | 批次差異大 | 無批次差異 | 無批次差異 | 無批次差異 |
| 操作方法 | 步驟繁瑣 需程序降溫凍存 | 簡單快捷 一步凍存-80℃冰箱 | 簡單快捷 一步凍存-80℃冰箱 | 簡單快捷 一步凍存-80℃冰箱 |
| 保存設(shè)備 | 要求高（液氮） | 要求低（-80℃冰箱） | 要求低（-80℃冰箱） | 要求低（-80℃冰箱） |
| 微量凍存 | 細胞易死亡,，存活率偏低 | 細胞存活率高 | 細胞存活率高 | 細胞存活率高 |
| 原位凍存 | 不可行 | 可行，且方便快捷 如: 雜交瘤細胞孔板凍存 | 可行,，且方便快捷 如: 雜交瘤細胞孔板凍存 | 可行,，且方便快捷 如: 雜交瘤細胞孔板凍存 |
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