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纖連蛋白Fibronectin-重組人纖維連接蛋白功能介紹
重組人纖維連接蛋白片段(Recombinant human fibronectin fragment,,以下簡稱Fibronectin,,纖連蛋白)為一段人工重組蛋白,,由574個氨基酸組成,,分子量約為63kDa,。
纖連蛋白Fibronectin-重組人纖維連接蛋白包括三個功能區(qū) :
[1] C-Domain:細胞粘附區(qū)域,,含RGD序列,,又稱細胞結(jié)合域(central cell-binding domain)
[2] H-Domain:提供病毒粘附,又稱肝***脂結(jié)合域(heparin-binding domain)
[3] CS-1位點:提供細胞粘附功能
纖連蛋白(Fibronectin)結(jié)構(gòu)如下圖所示
纖連蛋白Fibronectin-重組人纖維連接蛋白功能介紹
1. 提高逆轉(zhuǎn)錄病毒,、慢病毒的轉(zhuǎn)染效率
作用原理如下:
細胞表面VLA-4及VLA-5可分別與Fibronectin上的CS-1 位點及C-Domain結(jié)合,,逆轉(zhuǎn)錄病毒載體可以與H -Domain結(jié)合。在經(jīng)Fibronectin包被的培養(yǎng)容器表面,,細胞與病毒載體以高濃度共存,從而顯著提高病毒的轉(zhuǎn)染效率30~70%,。
2. 促進細胞黏連粘附及刺激細胞增殖
細胞的黏連是機體結(jié)構(gòu)得以維持,、細胞生長完成的必要條件,研究結(jié)果表明:Fibronectin作為細胞培養(yǎng)的基質(zhì),,可以促進細胞的黏連生長,,使多種細胞的貼壁率達到90%以上(對照組為10%),細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)良好,,細胞的代謝率增強,,DNA、RNA及蛋白質(zhì)合成速度提高約5倍,,細胞的集落率升高幾倍,,原代培養(yǎng)的成活率明顯提高,細胞生長時間縮短,。
同時,,F(xiàn)ibronectin能刺激細胞上千倍的增殖。作用原理是: Fibronectin和抗CD3抗體可分別與T淋巴細胞上的VLA和TCR結(jié)合,, 兩者共同作用激活酪氨酸激酶pp125FAK,,通過Ras途徑刺激T細胞的增殖和分化,,使其獲得上千倍的增殖。
3. 其它應(yīng)用
研究還證明,,F(xiàn)ibronectin能提高細胞的融合率,,縮短融合周期,可應(yīng)用于許多科研中,,如應(yīng)用于細胞雜交瘤技術(shù)等,。將Fibronectin涂到微球載體上作為細胞大量生產(chǎn)的介質(zhì),可以節(jié)省空間,,節(jié)省原材料,,成為應(yīng)用培養(yǎng)細胞技術(shù)來生產(chǎn)新藥品的基礎(chǔ)物質(zhì)。
賽爾瑞成提供高品質(zhì)纖連蛋白Fibronectin-重組人纖維連接蛋白,,是在符合GMP標(biāo)準(zhǔn)要求的潔凈間由原核系統(tǒng)表達,、經(jīng)分離純化和過濾除菌等步驟制成 ,分子量約為63.0 kDa,。該產(chǎn)品具有高純度,,高活性,低內(nèi)毒素的特點 ,,并通過 ISO9001,、ISO13485質(zhì)量體系雙重認證。
重組人Fibronectin產(chǎn)品特點
純化自重組 E.coli 菌株,,其中攜帶有編碼人纖維連接蛋白片段的質(zhì)粒
無血清無動物來源
內(nèi)毒素水平:<1 EU/μg
純度:經(jīng)SDS-PAGE電泳檢測純度>95%
生物學(xué)活性: 在促進小鼠3T3細胞的粘附和增殖實驗中,,我公司生產(chǎn)的重組人Fibronectin表現(xiàn)出較好的促增值活性,結(jié)果如下圖所示:
賽爾瑞成GMP級重組細胞因子
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賽爾瑞成有專業(yè)的原核發(fā)酵平臺、蛋白純化和制劑平臺,,2024年全新配備了500平米GMP級潔凈間及相關(guān)儀器設(shè)備,。技術(shù)團隊常年從事抗體和重組蛋白的開發(fā)工作,曾承擔(dān)國家“863"計劃項目,、國家重大新藥創(chuàng)制項目,、國家自然科學(xué)基金項目、省級科技攻關(guān)計劃項目等,,每年為客戶提供200多種重組蛋白和重組抗體定制服務(wù),。
目前,賽爾瑞成已研發(fā)出幾十種高品質(zhì)重組細胞因子, 均是在符合GMP標(biāo)準(zhǔn)要求的潔凈間內(nèi)制備,、質(zhì)檢,、包裝,產(chǎn)品均具有高純度>95%,高活性,低內(nèi)毒素<1EU/μg的特點,。已廣泛應(yīng)用于細胞培養(yǎng)相關(guān)研究和工業(yè)化生產(chǎn)領(lǐng)域,并得到了大量客戶的認可,。同時,,賽爾瑞成建立了完善的質(zhì)量管理體系,通過 ISO9001,、ISO13485質(zhì)量體系雙認證,,有效保障了重組細胞因子產(chǎn)品的高質(zhì)量和可追溯性。