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賽爾瑞成（北京）生命科學(xué)技術(shù)有限公司
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大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)是使用很廣泛的蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng),，擁有遺傳背景清楚,、表達(dá)水平高、操作簡(jiǎn)單,、培養(yǎng)周期短等優(yōu)點(diǎn),，市售的大約30%的重組蛋白產(chǎn)品都是由大腸桿菌系統(tǒng)生產(chǎn)而來(lái)。
應(yīng)用大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)時(shí),，為了得到符合科研和產(chǎn)業(yè)需求的重組蛋白目標(biāo)產(chǎn)物,，往往需要進(jìn)行目標(biāo)蛋白基因或菌種的突變，進(jìn)行大量且繁瑣的表達(dá)菌種和高表達(dá)蛋白突變體的篩選工作,。大腸桿菌作為宿主菌,，表達(dá)的蛋白定位為胞內(nèi)、胞外和周質(zhì)腔三種,。為獲得胞內(nèi)蛋白或周質(zhì)腔蛋白,，往往需要對(duì)大腸桿菌進(jìn)行破碎。雖然胞外蛋白可以借助信號(hào)肽的引導(dǎo)分泌到胞外,，但蛋白的分泌效率通常不高,，且很多時(shí)候，發(fā)酵中后期目標(biāo)蛋白才開(kāi)始運(yùn)輸?shù)桨?，?dǎo)致絕大多數(shù)蛋白仍儲(chǔ)存在胞內(nèi),，所以在進(jìn)行蛋白制備時(shí),，為提高蛋白收率，仍需要進(jìn)行細(xì)胞破碎,。因此,，破碎細(xì)胞是高通量篩選大腸桿菌菌種時(shí)必需的環(huán)節(jié)。
目前常用的破碎細(xì)胞的方法有超聲,、均質(zhì)機(jī)壓力,、溶菌酶、反復(fù)冷凍,、化學(xué)試劑等,，但是這些方法不同程度存在破碎效率低、成本高,、周期長(zhǎng),、細(xì)胞破碎不均一等的缺點(diǎn),。賽爾瑞成開(kāi)發(fā)的大腸桿菌專用破菌液,，能夠高效、簡(jiǎn)便的對(duì)大腸桿菌進(jìn)行細(xì)胞破碎,，特別適用于需要細(xì)胞破碎的高通量篩選,。
★ 產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
1. 原位破菌，使用便捷,，篩選成本更低
原位收集菌體,，原位破菌，高通量操作,。適用于各種型號(hào)培養(yǎng)板（如96孔板,、48孔板、6孔板等）,，節(jié)省儀器成本,、人力成本，節(jié)約時(shí)間,，方便操作,。
2. 組成成分溫和
不含還原劑、強(qiáng)變性劑,、離子型去污劑等烈性成分,，對(duì)絕大多數(shù)蛋白結(jié)構(gòu)和活性無(wú)影響。
★ 使用方法
1. 按常規(guī)方法,，在培養(yǎng)板（如96孔板,、48孔板、24孔板等）中接種培養(yǎng)大腸桿菌,，至蛋白表達(dá)完成,，即可使用孔板離心機(jī)離心收菌,，棄去上清，盡量去除干凈,；
2. 只需將孔板中收集的菌體按照孔板體積的五分之一左右加入破菌液,，簡(jiǎn)單混勻，置于-20°C以下冰箱,，待冷凍結(jié)實(shí),。需要破菌時(shí)取出室溫自然解凍充分，然后按常規(guī)方法高速冷凍離心,，收取破菌上清和菌體沉淀,。
