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對于做重組蛋白原核表達(大腸桿菌E.coli系統(tǒng))的小伙伴們,,破菌是必需的的流程之一,,目前用到的通用方法是用超聲儀進行超聲破菌。但是如果實驗室沒有超聲儀,,或者收集的菌量比較少,,就可以選擇賽爾瑞成的大腸桿菌專用破菌液。
大腸桿菌專用破菌液
產(chǎn)品優(yōu)勢
1. 節(jié)省成本
只需將菌體與破菌液簡單混勻,,然后凍融即可,,不需要超聲儀就能使菌體破碎,釋放可溶上清,。節(jié)省儀器成本和人力成本,。
2. 組成成分溫和
不含還原劑、強變性劑,、離子型去污劑等烈性成分,,對絕大多數(shù)蛋白結(jié)構(gòu)和活性無影響。
3. 使用搭配靈活
可搭配賽爾瑞成超級核酸酶(貨號:CR1001),,降解菌體裂解后的核酸,,以降低破菌液粘度,以利于后續(xù)操作,;也可以根據(jù)需要添加蛋白酶抑制劑,、還原劑、NaCl等成分,。
使用方法
以菌體(g)/化學(xué)破菌液(ml)=1:30(或1:10至1:50之間)比例加入大腸桿菌專用破菌液,,打散混勻,置于-20°C以下冰箱,,待冷凍結(jié)實,。需要破菌時取出自然解凍,然后按常規(guī)方法高速冷凍離心,,收取破菌上清和菌體沉淀,。
數(shù)據(jù)對比
注: 1:大腸桿菌專用破菌液破菌上清 2:大腸桿菌專用破菌液破菌沉淀
3:超聲破菌破菌上清 4:超聲破菌破菌沉淀
M:蛋白Marker
搭配賽多培®大腸桿菌高密度表達培養(yǎng)基,讓重組蛋白原核表達更簡單更方便,!
多培®大腸桿菌高密度表達培養(yǎng)基是賽爾瑞成研發(fā)的一種適合于大腸桿菌生長和蛋白表達的即用型全成分培養(yǎng)基。使用該培養(yǎng)基,,只需一步操作,,無需添加IPTG誘導(dǎo)劑,,即可收獲含表達蛋白的菌體,與常規(guī)方法相比,,對絕大多數(shù)蛋白表達,,其菌體生物量和對應(yīng)的目的蛋白都明顯提高數(shù)倍以上。