一.目的
為規(guī)范Bio-rad化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)的基本操作,、維護(hù)保養(yǎng)、異常處理程序,,防止人為操作失誤,,確保Bio-rad化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)正常運(yùn)轉(zhuǎn),特制定本程序,。
二.適用范圍
本程序適用于Bio-rad化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)操作,。
三.責(zé)任
1. 本程序的實(shí)施者為Bio-rad化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)操作者,各實(shí)驗室負(fù)責(zé)人對本程序的實(shí)施情況進(jìn)行監(jiān)督,。
2. 日常運(yùn)行及維護(hù),、定期維護(hù)、定期點(diǎn)檢及保養(yǎng)由Bio-rad化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)操作者負(fù)責(zé),。
四.內(nèi)容
1. 打開成像儀器電源,,將樣品放入工作臺。
2. 雙擊桌面上圖標(biāo),,打開Quantity One 軟件,,或從開始-程序-The Discovery Series/Quantity One進(jìn)入。
3. 從File下拉菜單中選擇ChemiDox XRS,,打開圖像采集窗口,。
4. Select Application 選擇相關(guān)應(yīng)用:
a UV Transillumination 透射UV:針對DNA EB膠或其他熒光;
b White Transillumination 透射白光:針對透光樣品如蛋白凝膠,,X-光片,;
c White Epillumination 側(cè)面白光:針對不透光樣品或蛋白凝膠;
d Chemiluminescnece 化學(xué)發(fā)光,,不打開任何光源,。
5. 單擊Live/Focus按鈕,激活實(shí)時調(diào)節(jié)功能,,此功能有三個上下鍵按鈕:IRIS(光圈),,ZOOM(縮放),F(xiàn)OCUS(聚焦),,可在軟件上直接調(diào)節(jié)或在儀器面板上手工調(diào)節(jié),,調(diào)節(jié)步驟: a調(diào)節(jié)IRIS至適合大小,; b點(diǎn)ZOOM將膠適當(dāng)放大,; c調(diào)節(jié)FOCUS至圖像清晰。
6. 如是DNA EB膠或其他熒光,,單擊Auto Expose,,系統(tǒng)將自動選擇曝光時間成像,如不滿意,單擊Manual Expose,,并輸入曝光時間(秒),,圖像滿意后保存。
如是蛋白凝膠,,接第5步驟直接將清晰的圖像保存即可,;如是化學(xué)發(fā)光樣品,將濾光片位置換到Chemi位(儀器上方右側(cè)),,將光圈開到大,,輸入Manual Expose時間,可對化學(xué)發(fā)光的弱信號進(jìn)行長時間累積如30min,,或單擊Live Acquire 進(jìn)行多幀圖像實(shí)時采集,,在對話框內(nèi)定義曝光時間長短,采集幾幀圖像,,在采集的多幀圖像中選取滿意的保存,。
五.注意事項:
1. 請勿將潮濕樣品長期放在暗箱內(nèi),以防腐蝕濾光片,,更不要將液體濺到暗箱底板上,,以免燒壞主板。
2. 使用后將平臺擦干凈,,以防有水損壞CCD,;切膠時在平臺上墊上保鮮膜,以防劃損平臺,。
3. 儀器使用完后請及時關(guān)閉電源,,特別是ChemiDox XRS的CCD電源。
4. 只有在進(jìn)行化學(xué)發(fā)光實(shí)驗時才需要提前打開冷CCD預(yù)熱30min再使用,,其他操作無需預(yù)熱,。
請勿使用控制成像儀的電腦上網(wǎng),也不要自行重裝電腦操作系統(tǒng)或給操作系統(tǒng)升級,。