詳細介紹
化學(xué)結(jié)構(gòu):
5-Carboxy-TET是一種帶有羧基(-COOH)的熒光染料,屬于TET(Tetrachlorofluorescein)系列熒光素,。這種化合物結(jié)合了熒光素的光學(xué)特性和羧基的化學(xué)反應(yīng)性,,廣泛用于生物化學(xué)和生物研究中,尤其是在熒光標記和檢測方面,。
TET:Tetrachlorofluorescein,,是一種熒光素,發(fā)出綠色熒光,。
COOH:羧基(-COOH)位于分子的5位,,用于化學(xué)偶聯(lián)反應(yīng)。
化學(xué)性質(zhì):羧基具有酸性,,可以與堿發(fā)生中和反應(yīng),,也可以與胺類或醇類發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng)。
結(jié)構(gòu)式:
基礎(chǔ)知識概述:
155911-13-0,,5-Carboxy-TET,TET carboxylic acid
英文名:5-Carboxy-TET,,TET carboxylic acid,,TET-COOH
分子式:C21H8Cl4O7
分子量:514.1
規(guī)格標準:1mg、5mg,、10mg
試劑廠家:陜西新研博美生物科技有限公司
合成方法:
1.羧基化反應(yīng)
從TET出發(fā),,通過化學(xué)反應(yīng)引入羧基。例如,,使用鹵代酸或酯化反應(yīng)引入羧基,。
使用鹵代酸(如溴乙酸)或酯化試劑(如DCC和NHS)。
注意事項:
純度標準95%+
保存建議:避免反復(fù)凍融,,避光保存,,儲液應(yīng)該立即使用,任何未用的溶液分裝小份冷凍于 < -20°C
注意事項:僅用于科學(xué)研究
相關(guān)應(yīng)用:
(1)生物標記
蛋白質(zhì)標記:
通過羧基與蛋白質(zhì)上的胺基(-NH?)發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng),,將熒光素標記到蛋白質(zhì)上,,用于熒光成像或流式細胞術(shù)。
例如,,使用N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)酯化反應(yīng),,將5-Carboxy-TET與蛋白質(zhì)上的胺基結(jié)合。
核酸標記:
通過羧基與核酸末端的胺基修飾位點結(jié)合,,用于熒光標記的核酸探針,。
例如,通過酰胺鍵將5-Carboxy-TET連接到核酸的末端,。
(2)熒光探針
細胞成像:
用于標記細胞內(nèi)的生物分子,,通過熒光顯微鏡觀察細胞內(nèi)的動態(tài)變化。
例如,,標記細胞膜蛋白或細胞器蛋白,,用于研究細胞的生理過程。
流式細胞術(shù):
用于標記細胞表面或細胞內(nèi)的生物分子,,通過流式細胞儀進行定量分析,。
例如,標記細胞表面的受體蛋白,,用于檢測細胞的活化狀態(tài),。
(3)藥物遞送
藥物偶聯(lián):
通過羧基與藥物分子上的胺基結(jié)合,將藥物分子連接到熒光素上,,用于藥物遞送系統(tǒng)的開發(fā),。
例如,,將藥物分子與5-Carboxy-TET結(jié)合,用于熒光成像指導(dǎo)的藥物遞送,。
實驗操作注意事項:
保存條件:應(yīng)密封保存在干燥、避光的環(huán)境中,,避免長時間暴露在空氣中,。
反應(yīng)條件:在進行偶聯(lián)反應(yīng)時,需要根據(jù)目標分子的性質(zhì)選擇合適的反應(yīng)條件(如pH值,、溫度,、反應(yīng)時間)。
純化:反應(yīng)后的產(chǎn)品可能需要通過色譜法(如HPLC)進行純化,,以去除未反應(yīng)的原料和副產(chǎn)物,。
應(yīng)用案例:
(1)蛋白質(zhì)標記
實驗步驟:
準備蛋白質(zhì)溶液:將目標蛋白質(zhì)溶解在適當(dāng)?shù)木彌_液中。
活化5-Carboxy-TET:將5-Carboxy-TET與NHS和DCC反應(yīng),,生成NHS酯,。
偶聯(lián)反應(yīng):將活化的5-Carboxy-TET與蛋白質(zhì)溶液混合,室溫孵育1-2小時,。
純化:通過透析或凝膠過濾去除未反應(yīng)的染料,。
檢測:通過熒光光譜儀或熒光顯微鏡檢測標記效果。
(2)核酸標記
實驗步驟:
準備核酸探針:將核酸探針末端修飾為胺基,。
活化5-Carboxy-TET:將5-Carboxy-TET與NHS和DCC反應(yīng),,生成NHS酯。
偶聯(lián)反應(yīng):將活化的5-Carboxy-TET與核酸探針混合,,室溫孵育1-2小時,。
純化:通過HPLC或凝膠電泳純化標記后的核酸探針。
檢測:通過熒光光譜儀檢測標記效果,。
相關(guān)試劑(部分):
Carboxy-PEG4-phosphonic acid ethyl ester
MTS-1,5-EDANS-Carboxyethyl
5(6)-Carboxy-X-rhodamine N-Succinimidyl Ester
Amino-Tri-(carboxyethoxymethyl)-methane (HCl)
diSulfo-Cy7 carboxylic acid(Ethyl)
Amino-Tri-(carboxyethoxymethyl)-methane
Mal-Cyclohexanecarboxylicacid
Carboxy-PEG11-phosphonic acid
Carboxy polymethylene
Carboxy-PEG11-sulfonic acid
2-Carboxyethyl methanethiosulfonate
2-Amino-1,3-bis(carboxylethoxy)propane HCl salt
Carboxy-Amido-PEG5-N-Boc
155911-13-0,,5-Carboxy-TET,TET carboxylic acid