化學(xué)結(jié)構(gòu)：

異硫氰酸熒光素酯（Fluorescein Isothiocyanate,，F(xiàn)ITC）是一種常用的熒光標記試劑,。

異硫氰酸熒光素酯具有良好的熒光特性和標記能力。 

結(jié)構(gòu)式：  

基礎(chǔ)知識概述:    

3326-32-7,，F(xiàn)luorescein Isothiocyanate 

中文名：異硫氰酸熒光素酯

英文名：Fluorescein Isothiocyanate 

分子式：C21H11NO5S 

分子量：389.38 

規(guī)格標準：1mg、5mg,、10mg 

試劑廠家：陜西新研博美生物科技有限公司

相關(guān)應(yīng)用：

生物分子標記：FITC的異硫氰酸基團可以與蛋白質(zhì)上的氨基,、巰基、咪唑,、酪氨酰,、羰基等基團結(jié)合，用于標記抗體,、凝集素等生物分子,。標記后的抗體或蛋白質(zhì)仍保留其特異性，可用于免疫熒光,、流式細胞術(shù),、免疫組化等檢測。

病原體檢測：通過標記抗體,，F(xiàn)ITC可用于快速鑒定細菌,、病毒或寄生蟲等病原體。

細胞與組織成像：可用于標記多糖,、脂質(zhì)等,，研究細胞吞噬,、血管通透性及組織分布。

蛋白質(zhì)相互作用研究：通過熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）技術(shù),，F(xiàn)ITC可用于研究蛋白質(zhì)之間的相互作用,。

使用說明：

1. 標記反應(yīng)

1) 取算好體積的新鮮配制的 50 μL FITC 緩慢加入到 1 mL 蛋白樣品溶液中，輕輕搖勻混合,，然后短暫離心將樣品收集在反應(yīng)管底部,。切忌劇烈混勻，防止蛋白樣品變性失活,。

2) 將該反應(yīng)小管置于避光處,，在室溫條件下輕輕搖晃孵育 8 h，每隔 30 分鐘,，將反應(yīng)小管輕輕顛倒幾次,，以充分混合兩種反應(yīng)物，提高標記效率,。

3) 加入 5 M 的 NH4Cl 至終濃度 50 mM,，4℃ 終止反應(yīng) 2 h。

2. 蛋白純化脫鹽

以下方案以使用 Sephadex G-25 柱純化染料蛋白偶聯(lián)物為例,。

1) 按照生產(chǎn)說明書制備 Sephadex G-25 柱,。

2) 將反應(yīng)混合物裝入Sephadex G-25 色譜柱頂部。

3) 當樣品運行到頂部樹脂表面下方時,，立即加入 PBS (pH 7.2-7.4),。

4) 向所需樣品中加入更多的PBS (pH 7.2-7.4)，完成柱純化,。結(jié)合物含有所需要的染料-蛋白質(zhì)綴合物的組分,。

注意事項：

純度標準95%+

保存建議：避免反復(fù)凍融，避光保存,，儲液應(yīng)該立即使用,，任何未用的溶液分裝小份冷凍于 < -20°C

注意事項：僅用于科學(xué)研究

相關(guān)試劑（部分）: 

Fluorescein-peg3-(n-boc)-amine

Fluorescein-thiourea-PEG2-azide

6-Fluorescein dT phosphoramidite

5'-(5-Fluorescein) phosphoramidite

N-(Azido-PEG2)-N-Fluorescein-PEG3-acid

Fluorescein 6-isothiocyanate

Fluorescein Potassium Salt

Fluorescein dipropionate

Fluorescein-5-thiosemicarbazide

Fluorescein-thiourea-PEG6-acid 

3326-32-7，F(xiàn)luorescein Isothiocyanate