79955-27-4，5-Carboxyfluorescein diacetate(5-CFDA)
中文名：5- 羧基熒光素二乙酸酯
英文名：5-Carboxyfluorescein diacetate(5-CFDA)
分子式：C25H16O9
分子量：460.39
規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)：1mg,、5mg,、10mg
試劑廠家：陜西新研博美生物科技有限公司

反應(yīng)機(jī)理：

熒光特性：5-CFDA本身是非熒光的，但在細(xì)胞內(nèi)或經(jīng)過(guò)水解后,，會(huì)生成具有強(qiáng)熒光的5-羧基熒光素（5-Carboxyfluorescein,，5-FAM），其激發(fā)波長(zhǎng)約為490 nm,，發(fā)射波長(zhǎng)約為518 nm,，熒光顏色為綠色 

5-CFDA是一種基于熒光素（Fluorescein）骨架的熒光染料前體。

熒光素核心：熒光素是一種常見的綠色熒光染料,，具有良好的熒光特性和水溶性,。

羧基（-COOH）：在熒光素的5號(hào)位置引入了一個(gè)羧基，使其可以與其他分子進(jìn)行化學(xué)偶聯(lián),。

二乙酸酯（diacetate）：兩個(gè)乙酸酯基團(tuán)（-OCOCH3）被引入到熒光素分子中,，使其在細(xì)胞外是非熒光的，但在細(xì)胞內(nèi)或經(jīng)過(guò)酯酶水解后,，會(huì)生成具有強(qiáng)熒光的5-羧基熒光素（5-FAM）,。這種設(shè)計(jì)使其成為一種細(xì)胞可滲透的熒光探針。

細(xì)胞活性檢測(cè)：5-CFDA常用于檢測(cè)細(xì)胞的活性和代謝狀態(tài),。細(xì)胞內(nèi)的酯酶可以水解5-CFDA,，生成綠色熒光的5-羧基熒光素（5-FAM），熒光強(qiáng)度與細(xì)胞活性成正比,。

細(xì)胞標(biāo)記：用于標(biāo)記細(xì)胞,，便于熒光顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)和分布。

細(xì)胞增殖檢測(cè)：通過(guò)熒光強(qiáng)度的變化,，可以監(jiān)測(cè)細(xì)胞的增殖和代謝活性,。

蛋白質(zhì)標(biāo)記：5-CFDA可以通過(guò)羧基與蛋白質(zhì)的氨基或其他活性基團(tuán)反應(yīng)，用于標(biāo)記蛋白質(zhì),。

核酸標(biāo)記：用于標(biāo)記寡核苷酸,，研究核酸的代謝和相互作用。

5-羧基熒光素二乙酸酯（5-CFDA）是一種熒光染料前體,，具有良好的細(xì)胞滲透性和熒光特性,。它可應(yīng)用于細(xì)胞成像、熒光探針開發(fā)和生物化學(xué)研究中,。

結(jié)構(gòu)式：

  

基礎(chǔ)知識(shí)概述:     

79955-27-4，5-Carboxyfluorescein diacetate(5-CFDA)

中文名：5- 羧基熒光素二乙酸酯 

英文名：5-Carboxyfluorescein diacetate(5-CFDA) 

分子式：C25H16O9

分子量：460.39

規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)：1mg,、5mg,、10mg 

試劑廠家：陜西新研博美生物科技有限公司

工作液的配制：

1.制備儲(chǔ)存液

用 DMSO 配制 10 mM 的 5-CFDA,。如用 0.2172 mL DMSO 溶解 1 mg 5-CFDA。

注：5-CFDA 儲(chǔ)存液建議分裝后于 -20℃ 或 -80℃ 避光保存,。

2.配制工作液

用預(yù)熱好的無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)基或 PBS 稀釋儲(chǔ)存液,，配制成 1-10 μM 的 5-CFDA 工作液。

注：請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整 5-CFDA 工作液濃度,，且現(xiàn)用現(xiàn)配,。

細(xì)胞染色：

1. 細(xì)胞制備：

懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，加入 PBS 洗滌兩次,，每次 5 分鐘,。

貼壁細(xì)胞：棄去培養(yǎng)基，加入蛋白酶消化細(xì)胞,。離心棄去上清后,，加入 PBS 洗滌兩次，每次 5 分鐘,。

2. 加入 1 mL 5-CFDA 工作液,，室溫孵育 15 分鐘。

3. 400 g,，4℃ 離心 3-4 分鐘,，棄去上清。

4. 加入 PBS 洗滌細(xì)胞兩次,，每次 5 分鐘。

5. 用 1 mL 無(wú)血清培養(yǎng)基或 PBS 重懸細(xì)胞后,，在熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀下檢測(cè),。

注意事項(xiàng)：

1. 5-CFDA 儲(chǔ)存液建議分裝后于 -20℃下避光保存，避免反復(fù)凍融,。 

2. 請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整 5-CFDA 工作液濃度,。

3. 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療,，不得用于食品或藥品,。

4. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,。

相關(guān)試劑（部分）: 

Carboxy-PEG5-sulfonic acid

Carboxy-EG6-undecanethiol

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79955-27-4,，5-Carboxyfluorescein diacetate(5-CFDA)