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Gilson固相萃取儀的具體操作流程介紹
Gilson固相萃取儀將固相萃取的各個步驟有效的集成于一個平臺,，可*實現(xiàn)整個固相萃取過程(活化、上樣,、淋洗,、干燥、洗脫)的全自動操作,，大大提高了樣品前處理的效率,，將分析工作者從繁瑣的前處理工作中解脫出來，使樣品前處理更快捷,、高效,。
Gilson固相萃取儀操作流程：
1.選擇小柱或濾膜
小柱或濾膜的大小與規(guī)格應(yīng)視樣品中待測物的濃度大小而定。對于濃度較低的體內(nèi)樣品,一般應(yīng)選用盡量少的固定相填料萃取較大體積的樣品,。
2.活化
萃取前先用充滿小柱的溶劑沖洗小柱或用5-10ml溶劑沖洗濾膜使填料保持濕潤,因為填料干燥會降低樣品保留值,，而各小柱的干燥程度不一,也會影響回收率的重現(xiàn)性。
3.上樣
一般可采取以下四種方法：
(1)用0.1mol/L酸或堿調(diào)節(jié),使pH<3或pH>9,離心取上層液萃??；
(2)用甲醇、乙腈等沉淀蛋白質(zhì)后取上清液,以水或緩沖液稀釋后萃??；
(3)用酸或無機鹽沉淀蛋白質(zhì)后取上清液,調(diào)節(jié)pH值后萃?。?/div>
(4)超聲15min后加入水,、緩沖液,取上清液萃取,。流速應(yīng)控制為1ml/min,流速快不利于待測物與固定相結(jié)合。
4.淋洗
反相SPE的清洗溶劑多為水或緩沖液,可在清洗液中加入少量有機溶劑,、無機鹽或調(diào)節(jié)pH值,。加入小柱的清洗液應(yīng)不超過一個小柱的容積,而SPE濾膜為5～10ml。
5.洗脫
應(yīng)選用5～10ml離子強度較弱但能洗下待測物的洗脫溶劑,。若需較高靈敏度,則可先將洗脫液揮干后,再用流動相重組殘留物后進樣,。體內(nèi)樣品洗脫后多含有水,可選用冷凍干燥法。保留能力較弱的SPE填料可用小體積,、較弱的洗脫液洗下待測物,再用極性較強的HPLC分析柱分析洗脫物。
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