二、發(fā)酵過程的操作
1. 接種:接種方法可采用火焰接種法或差壓接種法,。
(1)火焰接種法:在接種口用酒精火圈消毒,,然后打開接種口蓋,迅速將接種液倒入罐內(nèi),,在把蓋擰緊,。
(2)差壓法:在滅菌前放入墊片,接種時把接種口蓋打開,,先倒入一定量的酒精消毒,。待片刻后把種液瓶的針頭插入接種口的墊片。利用罐內(nèi)壓力和種液瓶內(nèi)的壓力差,,將種液引入罐內(nèi),,擰緊蓋子。
2. 罐壓
發(fā)酵過程中須手動控制罐壓,,即用出口閥控制罐內(nèi)壓力,。調(diào)節(jié)空氣流量的,須同時調(diào)節(jié)出口閥,,應保持罐內(nèi)壓力恒定大于0.03Mpa,。
3. 溶解氧(DO)的測量和控制
(1)溶解氧的標定:在接種前,在恒定的發(fā)酵溫度下,,將轉(zhuǎn)速及空氣量開到大值時的溶解氧DO值作為100%,。
(2)發(fā)酵過程的溶解氧DO測量和控制:DO的控制可采用調(diào)節(jié)空氣流量和調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速來達到。*簡單是轉(zhuǎn)速和溶氧的關(guān)聯(lián)控制,。其次則必須同時調(diào)節(jié)進氣量(手動)控制,。有時需要通入純氧(如在某些基因工程菌的高密度培養(yǎng)中)才能達到要求的DO值。
4. pH 的測量與控制
(1) pH值的校正:在滅菌前應對PH電極進行PH值的校正,。
(2)在發(fā)酵過程中PH值的控制使用蠕動泵的加酸加堿來達到的,,酸瓶或堿瓶須先在滅菌鍋中滅菌。
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