1. 單波長單光束分光光度計(jì)是一類結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,，使用,、維護(hù)比較方便，應(yīng)用廣泛的分光光度計(jì),。其設(shè)計(jì)原理和結(jié)構(gòu)具有以下特點(diǎn)：①單光束光路,，從光源到試樣至接收器只有一個(gè)光通道，使用中依次對(duì)參考樣品和待測(cè)試樣進(jìn)行測(cè)定,，然后將二次測(cè)定數(shù)據(jù)進(jìn)行比較,、計(jì)算，獲得終結(jié)果,；②儀器只有一個(gè)色散元件,，工作波長范圍較窄；③通常采用直接接收放大顯示的簡(jiǎn)單電子系統(tǒng),，用電表或數(shù)字顯示,；④結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、附件少,、功能范圍小,，不能做特殊試樣如渾濁樣品、不透明樣品等的測(cè)定,。

 

2.單光束分光光度計(jì)檢測(cè)的準(zhǔn)確性不夠穩(wěn)定,，不能用于精密分析。雙光束分光光度計(jì)的光路設(shè)計(jì)在其出射狹縫和樣品吸收池之間增加了一個(gè)光束分裂器或斬波器,，作用是以一定的頻率將一個(gè)光束交替分成兩路,，使一路經(jīng)過參比溶液，另一路經(jīng)過樣品溶液,，然后由一個(gè)檢測(cè)器交替接收或由兩個(gè)匹配器分別接收兩路信號(hào),。這是目前國內(nèi)外使用多，性能較為完善的一類分光光度計(jì),。原理和結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：①從光源到檢測(cè)器有試樣光路和參考光路兩條通路,，可同時(shí)對(duì)檢測(cè)樣品和參考樣品進(jìn)行測(cè)定，直接獲得檢測(cè)數(shù)據(jù),，還可自動(dòng)補(bǔ)償檢測(cè)時(shí)因條件的隨機(jī)變化（如溫度變化,、電源電壓波動(dòng)、放大器增益變化,、儀器掃描,、記錄系統(tǒng)的間隙變化等）或樣品中非測(cè)定組分的干擾所引起的影響，比單光束分光光度計(jì)使用更方便,、準(zhǔn)確,；②一般采用兩個(gè)光柵或棱鏡加光柵的雙單色器,，能有效地提高分辨率和降低雜散光；③可以自動(dòng)進(jìn)行波長掃描,、自動(dòng)記錄光譜曲線,，也可以外接計(jì)算機(jī)，實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化運(yùn)行,；④可裝備各種附件,，光、電,、機(jī)緊密結(jié)合,，功能范圍寬。

 

3.雙波長分光光度計(jì)能較好的解決由于非特征吸收信號(hào)（如試樣的渾濁,、吸收池與空氣界面以及吸收池與溶液界面的折射差別等）影響而帶來的誤差,。其基本原理是從同一光源發(fā)出的光分為兩束，分別經(jīng)兩個(gè)單色器分光后得到兩束不同波長（λ1,，λ2）的單色光,，經(jīng)斬光器使兩束光以一定頻率交替照射同一樣品，然后經(jīng)過檢測(cè)器顯示出兩個(gè)波長下的吸光度差值（ΔA=Aλ1-Aλ2）,。

 

只要λ1,、λ2選擇適當(dāng)（被測(cè)物在一個(gè)波長上有大吸收峰，在另一個(gè)波長上沒有吸收或很少吸收,；而非被測(cè)物在兩個(gè)波長上的吸收是相同的）,，ΔA就是消除了非特征性吸收干擾（即扣除了背景吸收）的吸光度值。這樣即可自動(dòng)扣除背景的影響,。雙波長分光光度計(jì)不用參比溶液,，只用一個(gè)待測(cè)溶液,，大大提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確度,。