詳細介紹
總膽固醇含量試劑盒HPLC法
總膽固醇含量試劑盒HPLC法
規(guī)格 : 50T/100T
測試方法:高效液相色譜法/HPLC
測定意義:
總膽固醇(Total Cholesterol,,TC)包括游離膽固醇和膽固醇酯,。TC是指組織中所有脂蛋白所含膽固醇之總和。人體的膽固醇除來自食物外,,還可在體內(nèi)由乙酰輔酶A合成,,成人肝臟和小腸可提供約90%的內(nèi)源性膽固醇。血清總膽固醇水平受年齡,、家族,、性別、遺傳、飲食,、精神等多種因素的影響,,男性高于女性,體力勞動者低于腦力勞動者,。由于血清總膽固醇與動脈粥樣硬化,、冠心病、腦卒中等心腦血管疾病關(guān)系密切,,血清總膽固醇測定已成為血脂分析的常規(guī)項目,。
測定原理:
在氫氧化鉀-無水乙醇溶液中膽固醇酯會水解生成游離膽固醇(FC),游離膽固醇在210 nm下有吸收峰,,可以利用高效液相色譜法測定其含量,。
高效液相色譜法簡介:
高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography HPLC)又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”,、“高分離度液相色譜”,、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個重要分支,,以液體為流動相,,采用高壓輸液系統(tǒng),將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑,、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,,在柱內(nèi)各成分被分離后,進入檢測器進行檢測,,從而實現(xiàn)對試樣的分析,。該方法已成為化學、醫(yī)學,、工業(yè),、農(nóng)學、商檢和法檢等學科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)應(yīng)用 ,。
高效液相色譜法具有“四高一廣”的特點:
①高壓:流動相為液體,,流經(jīng)色譜柱時,受到的阻力較大,,為了能迅速通過色譜柱,必須對載液加高壓,。
②高速:分析速度快,、載液流速快,較經(jīng)典液體色譜法速度快得多,,通常分析一個樣品在15~30分鐘,,有些樣品甚至在5分鐘內(nèi)即可完成,一般小于1小時。
③高效:分離效能高,??蛇x擇固定相和流動相以達到很好的分離效果,比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍,。
④高靈敏度:紫外檢測器可達0.01ng,,進樣量在μL數(shù)量級。
⑤應(yīng)用范圍廣:百分之七十以上的有機化合物可用高效液相色譜分析,,特別是高沸點,、大分子、強極性,、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析,,顯示出優(yōu)勢。
⑥柱子可反復使用:用一根柱子可分離不同化合物
⑦樣品量少,、容易回收:樣品經(jīng)過色譜柱后不被破壞,,可以收集單一組分或做制備。
此外高效液相色譜還有色譜柱可反復使用,、樣品不被破壞,、易回收等優(yōu)點。
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