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上海臻科生物科技有限公司 |
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一、大鼠C-肽(C-Peptide)ELISA試劑盒詳細(xì)介紹
中文名稱:大鼠C-肽(C-Peptide)ELISA試劑盒
規(guī)格: 48T /96T
品牌:臻科生物
種屬:大鼠
檢測(cè)波長(zhǎng):450 nm
所需樣本體積: 50ul
適用范圍:僅供科研,，不得用于臨床診斷,。
保存及有效期:2-8℃，六個(gè)月
檢測(cè)樣本種類:用于測(cè)定血清,，血漿及相關(guān)液體等樣本的含量或者表達(dá),。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、灌洗液,、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本,。
臻科生物供應(yīng)的種屬有：人,、大鼠、小鼠,、豚鼠,、兔子、人,、豬牛羊,、雞鴨鵝、植物ELISA試劑盒等
二,、實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠C-肽(C-Peptide)水平,。用純化的大鼠C-肽(C-Peptide)抗體包被微孔板，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入C-肽(C-Peptide),，再與HRP 標(biāo)記的C-肽(C-Peptide)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB 顯色,。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的C-肽(C-Peptide)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值）,，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠C-肽(C-Peptide)濃度。
三,、試劑盒組成
1 | 30 倍濃縮洗滌液 | 20ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品（240 pmol/L） | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說(shuō)明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
四,、操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。
5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測(cè)樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動(dòng)混勻,。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次，拍干,。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,，空白孔除外。
7.溫育：操作同3,。
8.洗滌：操作同5,。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色10分鐘.
10.終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11.測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）,。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。
五、試劑盒計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),，OD 值為縱坐標(biāo),，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,，根據(jù)樣品的
OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù),；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計(jì)算出標(biāo)
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,，將樣品的OD 值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度,，再乘以稀釋倍數(shù),，
即為樣品的實(shí)際濃度。
六,、注意事項(xiàng)
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,，酶標(biāo)包被板開封后如未
用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
2．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器,，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時(shí)間
控制在5 分鐘內(nèi),，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣,。
4．請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD 值
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD 值）,，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測(cè)定,，計(jì)
算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。
6．底物請(qǐng)避光保存。
7．嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9．本試劑不同批號(hào)組分不得混用,。
七．特別提醒
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3 的樣品,，因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性,。
八．更多優(yōu)勢(shì)產(chǎn)品
ZK-03023 小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒
ZK-03024 小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒
ZK-03025 小鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)ELISA試劑盒
ZK-03026 小鼠白介素10(IL-10)ELISA試劑盒
ZK-03027 小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒
ZK-03028 小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒
ZK-03029 小鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒
ZK-03030 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒
ZK-03031 小鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒
ZK-03032 小鼠白介素15(IL-15)ELISA試劑盒
ZK-03033 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒
ZK-03034 小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
ZK-03035 小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒
ZK-03036 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒
ZK-03037 小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)ELISA試劑盒
ZK-03038 小鼠白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒
ZK-03039 小鼠煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒
ZK-03040 小鼠磷脂酰絲氨酸(PS)ELISA試劑盒
ZK-03041 小鼠β-防御素(β-DF)ELISA試劑盒
ZK-03042 小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)ELISA試劑盒
ZK-03043 小鼠膽堿磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA試劑盒
ZK-03044 小鼠乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒
ZK-03045 小鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒
ZK-03046 小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)ELISA試劑盒
ZK-03047 小鼠抗紅細(xì)胞抗體(RBC)ELISA試劑盒
ZK-03048 小鼠氧化型谷胱甘肽(GSGS)ELISA試劑盒
ZK-03049 小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA試劑盒
ZK-03050 小鼠癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA試劑盒
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