詳細介紹
一,、大鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒詳細介紹
中文名稱:大鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒
規(guī)格: 48T /96T
品牌:臻科生物
種屬:大鼠ELISA試劑盒
檢測波長:450 nm
所需樣本體積: 50ul
適用范圍:僅供科研,不得用于臨床診斷,。
保存及有效期:2-8℃,六個月
檢測樣本種類:用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本的含量或者表達,。例如適合檢測包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水,、灌洗液、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本。
臻科生物供應(yīng)的種屬有:人,、大鼠,、小鼠、豚鼠,、兔子,、人、豬牛羊,、雞鴨鵝,、植物ELISA試劑盒等
二、實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠白介素13(IL-13)水平,。用純化的大鼠白介素13(IL-13)抗體包被微孔板,,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加大鼠白介素13(IL-13),,再與HRP 標(biāo)記的白介素13(IL-13)抗體結(jié)合,,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色,。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素13(IL-13)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),,通過標(biāo)準曲線計算樣品中大鼠白介素13(IL-13)濃度。
三,、試劑盒組成
1 | 30 倍濃縮洗滌液 | 20ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準品(240 pmol/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
四,、操作步驟
1.標(biāo)準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。
5號標(biāo)準品 | 150μl的原倍標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液 |
4號標(biāo)準品 | 150μl的5號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液 |
3號標(biāo)準品 | 150μl的4號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液 |
2號標(biāo)準品 | 150μl的3號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液 |
1號標(biāo)準品 | 150μl的2號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液 |
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同)、標(biāo)準孔,、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外,。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5,。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色10分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測定:以空白孔調(diào)零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。
五,、試劑盒計算
以標(biāo)準物的濃度為橫坐標(biāo),,OD 值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準曲線,,根據(jù)樣品的
OD 值由標(biāo)準曲線查出相應(yīng)的濃度,;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準物的濃度與OD 值計算出標(biāo)
準曲線的直線回歸方程式,,將樣品的OD 值代入方程式,,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),,
即為樣品的實際濃度,。
六、注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開封后如未
用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,,洗滌時不影響結(jié)果,。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,,以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標(biāo)準曲線,,做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值
大于標(biāo)準品孔di一孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,,計
算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染,。
6.底物請避光保存,。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
七.特別提醒
1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,,提取按相關(guān)文獻進行,,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,,可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
八.更多優(yōu)勢產(chǎn)品
ZK-03023 小鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒
ZK-03024 小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒
ZK-03025 小鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)ELISA試劑盒
ZK-03026 小鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒
ZK-03027 小鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒
ZK-03028 小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒
ZK-03029 小鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒
ZK-03030 小鼠巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒
ZK-03031 小鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒
ZK-03032 小鼠白介素15(IL-15)ELISA試劑盒
ZK-03033 小鼠巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒
ZK-03034 小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒
ZK-03035 小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒