詳細(xì)介紹
【產(chǎn)品名稱(chēng)】雞滑液囊支原體(MS)PCR試劑盒
【包裝規(guī)格】 50T/盒實(shí)時(shí)熒光PCR法
適用于檢測(cè),可用于臨床雞滑液囊支原體(MS)感染的輔助診斷,,但不作確診使用,。
利用相應(yīng)儀器對(duì) PCR 過(guò)程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè),實(shí)現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果的定性分析,,用于臨床上對(duì)可疑感染者的病原 學(xué)診斷,。
反應(yīng)液、酶液,、陽(yáng)性質(zhì)控品,、陰性質(zhì)控品。
-20℃±5℃,,避光保存,、運(yùn)輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過(guò) 5 次,,有效期 12 個(gè)月,。
ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P,、LightCycler,、Bio-Rad、Eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測(cè)儀,。上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃,,長(zhǎng)期保存可置-70℃,,但不能超過(guò) 6 個(gè)月,,標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸, 嚴(yán)禁反復(fù)凍融,。
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1.1樣本前處理 血液,、體液和棉拭子樣本取 100μL 于 1.5mL 滅菌離心管中,。 核酸提取 推薦采用核酸提qu或純化試劑(磁珠法或離心柱法)進(jìn)行核酸提qu, 請(qǐng)按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,。
試劑RP
將混合好的測(cè)試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中,,21μL/管。
3.加樣(樣本處理區(qū)) 將步驟 1 提取的核酸,、陽(yáng)性質(zhì)控品,、陰性質(zhì)控品各取 4μL,分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中,,蓋好管蓋,,混勻,短 暫離心,。
4.1
4.2
4.3推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置:
步驟 | 溫度 | 收集熒光信號(hào) | 1cycle | 10min |
2 | 94℃ | 否 | 30sec | |
2.結(jié)果分析判定 結(jié)果分析條件設(shè)定 設(shè)置 Baseline 和 Threshold:一般直接按機(jī)器自動(dòng)分析的結(jié)果分析,,當(dāng)曲線(xiàn)出現(xiàn)整體傾斜時(shí),根據(jù)分析后圖像 調(diào)節(jié) Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié)),,以及 Threshold 的 Value 值(上下拖動(dòng)閾值線(xiàn)至高于陰性對(duì)照),重新分析結(jié)果,。結(jié)果判斷 陽(yáng)性:檢測(cè)通道 Ct 值≤35,,且曲線(xiàn)有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)曲線(xiàn); 可疑:檢測(cè)通道 35值≤38,,建議重復(fù)檢測(cè),,如果檢測(cè)通道仍為 35值≤38,且曲線(xiàn)有明顯的增長(zhǎng)曲線(xiàn),, 判定為陽(yáng)性,,否則為陰性; 陰性:樣本檢測(cè)結(jié)果 Ct 值>38 或無(wú) Ct 值,。
4.檢測(cè)方法的局限性
2.樣本提取過(guò)程中沒(méi)有控制好交叉污染,,會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果;
4.病原體在流行過(guò)程中基因突變,、重組,,會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果;
6.試劑運(yùn)輸,,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效能下降,,出現(xiàn)假陰性或定量檢測(cè)不準(zhǔn)確的結(jié)果;
7.本檢測(cè)結(jié)果僅供參考,,如須確診請(qǐng)結(jié)合臨床癥狀以及其他檢測(cè)手段,。
1.所有操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行;
3.反應(yīng)液應(yīng)避光保存,;
5.使用一次性吸頭,、一次性手套和各區(qū)專(zhuān)用工作服,;
7.實(shí)驗(yàn)完畢后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外燈處理工作臺(tái)和移液器;
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