一、禽白血病病毒檢測(cè)試劑盒

　　二,、通用名稱：禽白血病病毒檢測(cè)試劑盒 （實(shí)時(shí)熒光PCR法）

　　三,、包裝規(guī)格 50T/盒

　　四、預(yù)期用途：

　　適用于禽白血病病毒檢測(cè),，可用于臨床禽白血病病毒感染的輔助診斷,，但不作確診使用。

　　五,、原理：

　　針對(duì)引起禽白血病的禽C型反錄病毒群的病毒基因組高度保守區(qū)域設(shè)計(jì)特異性引物和探針,，在反應(yīng)體系中含禽C型反錄病毒群的病毒基因組模板的情況下，PCR反應(yīng)得以進(jìn)行并釋放熒光信號(hào),。利用熒光定量PCR儀對(duì)PCR過(guò)程中相應(yīng)通道信號(hào)進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和輸出,，實(shí)現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果的定性分析。

　　六,、組成：

　　RT-PCR反應(yīng)液,、混合酶液、陽(yáng)性對(duì)照,、陰性對(duì)照,。

 

　　七、樣品DNA的制備

　　用自選方法提取Cps DNA,。注意：DNA純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素,。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PGR再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度,。

　　制備Cps標(biāo)準(zhǔn)曲線（以10-10E6這6個(gè)10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,，只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的DN段作為陽(yáng)性對(duì)照,。

　　1,、標(biāo)記6個(gè)離心管，分別為6,5,4,3,2和1號(hào),。

　　2,、用帶芯槍頭分別加入45μL超純水(最好用帶芯槍頭，下同)

　　3,、先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,，梯度稀釋至0E7拷貝/μL)

　　4、在6號(hào)管中加入5μL10E7拷貝/uL的Cps陽(yáng)性對(duì)照（上步稀釋所得),，充分震蕩1分鐘,，得10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照.

 

　　八、技術(shù)參數(shù)

　　1,、符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN/T1686-2005《新城疫病毒中強(qiáng)毒株檢測(cè))法：熒光RT-PCR法》的檢測(cè)要求,，可用于禽肉、禽類組織臟器禽類排泄和分泌物,，及其泄殖腔和咽喉拭樣中新城疫病毒的檢測(cè),。

　　2、靈敏度：對(duì)于接種的雞胚尿囊液,，檢測(cè)的zu高稀釋度可達(dá)0-8~10-7,與雞胚病毒分離方法的靈敏度接近,。定量檢測(cè)線性范圍可達(dá)10-1010拷貝/ml。

　　3,、特異性：采用新基因序列數(shù)據(jù)庫(kù)設(shè)計(jì),，并通過(guò)系統(tǒng)驗(yàn)證新城疫病毒RT-PCR能夠檢測(cè)所有已知新城疫病毒毒株。對(duì)于其它禽類感染因子,，本試劑盒檢測(cè)結(jié)果為陰性

　　4,、產(chǎn)品盒組成：（不包括新城疫病毒RNA提取試劑，用戶可采用通用型病毒RNA提取試劑盒或試劑盒推薦的提取方法,。)

　　組成成份(48T/kit)

　　1,、RNA提取液30ml 1瓶

　　2、DEPC水5ml 1瓶

　　3、新城疫病毒RT-PCR一步法反應(yīng)液 920u|1管

　　4,、逆轉(zhuǎn)錄酶(5U/ul)

　　5,、使用說(shuō)明書(shū)一份