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詳細(xì)介紹
一,、產(chǎn)品規(guī)格參數(shù)：
名稱：呋喃唑酮代謝物(AOZ)ELISA試劑盒
規(guī)格：96T
檢測方法：ELISA方法
檢測波長：450/630nm
品牌：臻科生物
適用范圍：僅供科研
檢測樣本種類：肌肉和肝臟組織,、尿樣、血清,、飼料,、動物組織、水產(chǎn),、蜂蜜,、牛奶等。
貯藏：試劑盒于2-8℃保存,，避免冷凍,。
保質(zhì)期：該產(chǎn)品有效期為1年，生產(chǎn)日期見包裝盒,。
二,、標(biāo)本的處理:
(1)細(xì)胞培養(yǎng)上清液
根據(jù)需要用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液稀釋樣品,然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是稀釋5倍,。
(2)腦脊液
根據(jù)需要用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液稀釋樣品,然后按照說明書所述方法檢測,。推薦稀釋濃度是5倍。
(3)血漿
?、儆肊DTA2K離心收集在真空血液收集管中的血液,5,000×g,15分鐘,4℃,分離血漿樣品,然后儲存在零下80℃直到使用,。
②用試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液5倍稀釋血漿以避免血漿中的干擾物質(zhì)影響檢測,按照說明書特定方法檢測,。
三,、呋喃唑酮代謝物(AOZ)ELISA試劑盒操作步驟：
方法1：用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
（1）包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml,。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,，4℃過夜。次日,，棄去孔內(nèi)溶液,，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘,。(簡稱洗滌,，下同),。
（2）加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,，置37℃孵育1小時,。然后洗滌。(同時做空白孔,，陰性對照孔及陽性對照孔),。
（3）加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中,，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml,。37℃孵育0.5～1小時，洗滌,。
?。?）加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘,。
?。?）終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
?。?）結(jié)果判定：可于白色背景上,，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng),，陰性反應(yīng)為無色或極淺,，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”,、“-”號表示,。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色,，則410nm)處,，以空白對照孔調(diào)零后測各孔O·D值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,，即為陽性,。
方法2：用于檢測未知抗體的間接法：
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml,，4℃過夜,。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌,。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中,，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,，37℃孵育30-60分鐘,，洗滌,最后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4,、5,、6。
四,、特別說明：
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