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大鼠90kDa熱休克蛋白αA1(HSP90αA1)試劑盒

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更新時(shí)間:2024-07-03 16:54:04瀏覽次數(shù):660

聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
大鼠90kDa熱休克蛋白αA1(HSP90αA1)試劑盒操作簡單,、結(jié)果精確,,臻科生物從業(yè)多年一直專心致力于免疫學(xué)技術(shù)的積累與發(fā)展,以其優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品質(zhì)量與專業(yè)的技術(shù)服務(wù),,贏得業(yè)內(nèi)廣大人士的認(rèn)可,。我司也一直和國內(nèi)外眾多高等院校與科研單位保持良好的合作關(guān)系,共同努力合作共贏,。

詳細(xì)介紹

一,、大鼠90kDa熱休克蛋白αA1(HSP90αA1)試劑盒詳細(xì)介紹

中文名稱:大鼠90kDa熱休克蛋白αA1(HSP90αA1)試劑盒

規(guī)格: 48T /96T

品牌:臻科生物

種屬:大鼠ELISA試劑盒

檢測波長:450 nm

所需樣本體積: 50ul

適用范圍:僅供科研,不得用于臨床診斷,。

保存及有效期:2-8℃,,六個(gè)月

檢測樣本種類:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本的含量或者表達(dá),。例如適合檢測包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、灌洗液、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本。

臻科生物供應(yīng)的種屬有:人,、大鼠,、小鼠、豚鼠,、兔子、人,、豬牛羊,、雞鴨鵝、植物ELISA試劑盒等

二,、實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠90kDa熱休克蛋白αA1(HSP90αA1)水平,。用純化的大鼠90kDa熱休克蛋白αA1(HSP90αA1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加大鼠90kDa熱休克蛋白αA1(HSP90αA1),,再與HRP 標(biāo)記的90kDa熱休克蛋白αA1(HSP90αA1)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色,。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的90kDa熱休克蛋白αA1(HSP90αA1)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠90kDa熱休克蛋白αA1(HSP90αA1)濃度。

三,、試劑盒組成

1

30 倍濃縮洗滌液

20ml×1 瓶

7

終止液

6ml×1 瓶

2

酶標(biāo)試劑

6ml×1 瓶

8

標(biāo)準(zhǔn)品(240 pmol/L)

0.5ml×1 瓶

3

酶標(biāo)包被板

12 孔×8 條

9

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5ml×1 瓶

4

樣品稀釋液

6ml×1 瓶

10

說明書

1 份

5

顯色劑A 液

6ml×1 瓶

11

封板膜

2 張

6

顯色劑 B 液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1 個(gè)

 

 

四,、操作步驟

1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。

5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

 

2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻,。

3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,拍干,。

6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外。

7.溫育:操作同3,。

8.洗滌:操作同5,。

9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色10分鐘.

10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。

11.測定:以空白孔調(diào)零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

五,、試劑盒計(jì)算

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),,OD 值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,,根據(jù)樣品的

OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計(jì)算出標(biāo)

準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,,將樣品的OD 值代入方程式,,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),,

即為樣品的實(shí)際濃度,。

 

六、注意事項(xiàng)

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,,酶標(biāo)包被板開封后如未

用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間

控制在5 分鐘內(nèi),,如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣。

4.請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值

大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,,計(jì)

算時(shí)請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染,。

6.底物請避光保存,。

7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用,。

 

七.特別提醒

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能

馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。

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