大鼠Ki-67蛋白（Ki67P）ELISA試劑盒操作簡單,、結(jié)果精確,，臻科生物從業(yè)多年一直專心致力于免疫學(xué)技術(shù)的積累與發(fā)展，以其優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品質(zhì)量與專業(yè)的技術(shù)服務(wù),，贏得業(yè)內(nèi)廣大人士的認(rèn)可,。我司也一直和國內(nèi)外眾多高等院校與科研單位保持良好的合作關(guān)系，共同努力合作共贏,。

一,、大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA試劑盒詳細介紹

中文名稱:大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA試劑盒

規(guī)格: 48T /96T

品牌:臻科生物

種屬:大鼠ELISA試劑盒

檢測波長:450 nm

所需樣本體積: 50ul

適用范圍:僅供科研，不得用于臨床診斷,。

保存及有效期:2-8℃,，六個月

檢測樣本種類:用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本的含量或者表達,。例如適合檢測包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、灌洗液、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本。

臻科生物供應(yīng)的種屬有：人,、大鼠,、小鼠,、豚鼠、兔子,、人,、豬牛羊、雞鴨鵝,、植物ELISA試劑盒等

二,、實驗原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)水平。用純化的大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)抗體包被微孔板,，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)，再與HRP 標(biāo)記的白介素20(IL-20)抗體結(jié)合,，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的白介素20(IL-20)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD 值）,，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)濃度,。

三、試劑盒組成

1	30 倍濃縮洗滌液	20ml×1 瓶	7	終止液	6ml×1 瓶
2	酶標(biāo)試劑	6ml×1 瓶	8	標(biāo)準(zhǔn)品（240 pmol/L）	0.5ml×1 瓶
3	酶標(biāo)包被板	12 孔×8 條	9	標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液	1.5ml×1 瓶
4	樣品稀釋液	6ml×1 瓶	10	說明書	1 份
5	顯色劑A 液	6ml×1 瓶	11	封板膜	2 張
6	顯色劑 B 液	6ml×1/瓶	12	密封袋	1 個

 

 

四,、操作步驟

1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。

5號標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
4號標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3號標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2號標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1號標(biāo)準(zhǔn)品	150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次,，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,，空白孔除外,。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5,。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色10分鐘.

10.終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。

11.測定：以空白孔調(diào)零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

五,、試劑盒計算

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),，OD 值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,，根據(jù)樣品的

OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計算出標(biāo)

準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,，將樣品的OD 值代入方程式,，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù),，

即為樣品的實際濃度,。

 

六、注意事項

1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,，酶標(biāo)包被板開封后如未

用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結(jié)果。

3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,，以避免試驗誤差。一次加樣時間

控制在5 分鐘內(nèi),，如標(biāo)本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣。

4．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,，做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD 值

大于標(biāo)準(zhǔn)品孔di一孔的OD 值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定，計

算時請后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。

5．封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存,。

7．嚴(yán)格按照說明書的操作進行,，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。

9．本試劑不同批號組分不得混用,。

 

七．特別提醒

1.標(biāo)本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行,，提取后應(yīng)盡快進行實驗,。若不能

馬上進行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測含NaN3 的樣品,，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

八．更多優(yōu)勢產(chǎn)品

ZK-03771 大鼠Ki-67蛋白(Ki67P)ELISA試劑盒

ZK-03772 大鼠Janus激酶3(JAK3)ELISA試劑盒

ZK-03773 大鼠Janus激酶2(JAK2)ELISA試劑盒

ZK-03774 大鼠GATA結(jié)合蛋白2(GATA2)ELISA試劑盒

ZK-03775 大鼠E選擇素(SELE)ELISA試劑盒

ZK-03776 大鼠Endoglin蛋白(ENG)ELISA試劑盒

ZK-03777 大鼠E1A結(jié)合蛋白P300(EP300)ELISA試劑盒

ZK-03778 大鼠D-二聚體(D2D)ELISA試劑盒

ZK-03779 大鼠Discs大同源物4(DLG4)ELISA試劑盒

ZK-03780 大鼠Disabled同源物1(DAB1)ELISA試劑盒

ZK-03781 大鼠Dickkopf相關(guān)蛋白3(DKK3)ELISA試劑盒

ZK-03782 大鼠Dickkopf相關(guān)蛋白1(DKK1)ELISA試劑盒

ZK-03783 大鼠C組著色性干皮病偶聯(lián)因子(XPC)ELISA試劑盒

ZK-03784 大鼠C-型鈉尿肽(CNP)ELISA試劑盒

ZK-03785 大鼠C-肽(C-Peptide)ELISA試劑盒

ZK-03786 大鼠CD83分子(CD83)ELISA試劑盒

ZK-03787 大鼠CD40配體(CD40L)ELISA試劑盒

ZK-03788 大鼠CD3d分子(CD3d)ELISA試劑盒

ZK-03789 大鼠CD320分子(CD320)ELISA試劑盒

ZK-03790 大鼠CD30配體(CD30L)ELISA試劑盒

ZK-03791 大鼠CD14分子(CD14)ELISA試劑盒

ZK-03792 大鼠CCAAT增強子結(jié)合蛋白β(CEBPβ)ELISA試劑盒

ZK-03793 大鼠cAMP應(yīng)答元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA試劑盒

ZK-03794 大鼠C4結(jié)合蛋白α(C4BPα)ELISA試劑盒

ZK-03795 大鼠B-細胞淋巴瘤因子2(Bcl2)ELISA試劑盒

ZK-03796 大鼠B-細胞激活因子(BAFF)ELISA試劑盒

ZK-03797 大鼠B-淋巴細胞趨化因子1(BLC1)ELISA試劑盒

ZK-03798 大鼠B-淋巴細胞激活抗原B7-2(LAB7-2)ELISA試劑盒

ZK-03799 大鼠BH3相互作用域死亡激動劑(Bid)ELISA試劑盒

ZK-03800 大鼠Bcl2關(guān)聯(lián)X蛋白(Bax)ELISA試劑盒

ZK-03801 大鼠Bcl2/腺病毒E1B相互作用蛋白3(BNIP3)ELISA試劑盒

ZK-03802 大鼠Apelin受體(APLNR)ELISA試劑盒

ZK-03803 大鼠Apelin蛋白(APLN)ELISA試劑盒

ZK-03804 大鼠Apelin大鼠13蛋白(AP13)ELISA試劑盒

ZK-03805 大鼠AMP激活蛋白激酶β1(PRKAβ1)ELISA試劑盒

ZK-03806 大鼠AMPA離子能谷氨酸受體1(GRIA1)ELISA試劑盒

ZK-03807 大鼠Ⅹ型膠原(COL10)ELISA試劑盒

ZK-03808 大鼠Ⅸ型膠原α1(COL9α1)ELISA試劑盒

ZK-03809 大鼠Ⅵ型膠原α1(COL6α1)ELISA試劑盒

ZK-03810 大鼠Ⅳ型膠原α1(COL4α1)ELISA試劑盒

ZK-03811 大鼠Ⅳ型膠原(COL4)ELISA試劑盒

ZK-03812 大鼠Ⅲ型前膠原氨基端原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒

ZK-03813 大鼠Ⅲ型前膠原(PCⅢ)ELISA試劑盒