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大鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1)ELISA試劑盒

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  • 大鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1)ELISA試劑盒

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更新時間:2024-07-03 10:43:30瀏覽次數(shù):578

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
大鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1)ELISA試劑盒操作簡單,、結(jié)果精確,,臻科生物從業(yè)多年一直專心致力于免疫學技術(shù)的積累與發(fā)展,以其優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品質(zhì)量與專業(yè)的技術(shù)服務(wù),,贏得業(yè)內(nèi)廣大人士的認可,。我司也一直和國內(nèi)外眾多高等院校與科研單位保持良好的合作關(guān)系,共同努力合作共贏,。

詳細介紹

一,、大鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1)ELISA試劑盒詳細介紹

中文名稱:大鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1)ELISA試劑盒

規(guī)格: 48T /96T

品牌:臻科生物

種屬:大鼠ELISA試劑盒

檢測波長:450 nm

所需樣本體積: 50ul

適用范圍:僅供科研,,不得用于臨床診斷。

保存及有效期:2-8℃,,六個月

檢測樣本種類:用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本的含量或者表達。例如適合檢測包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、灌洗液,、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標本,。

臻科生物供應(yīng)的種屬有:人、大鼠,、小鼠,、豚鼠、兔子,、人,、豬牛羊、雞鴨鵝,、植物ELISA試劑盒等

二,、實驗原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中大鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1)水平。用純化的大鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1)抗體包被微孔板,,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加大鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1),再與HRP 標記的細胞間粘附分子1(ICAM-1)抗體結(jié)合,,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的細胞間粘附分子1(ICAM-1)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),,通過標準曲線計算樣品中大鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1)濃度,。

三、試劑盒組成

1

30 倍濃縮洗滌液

20ml×1 瓶

7

終止液

6ml×1 瓶

2

酶標試劑

6ml×1 瓶

8

標準品(240 pmol/L)

0.5ml×1 瓶

3

酶標包被板

12 孔×8 條

9

標準品稀釋液

1.5ml×1 瓶

4

樣品稀釋液

6ml×1 瓶

10

說明書

1 份

5

顯色劑A 液

6ml×1 瓶

11

封板膜

2 張

6

顯色劑 B 液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1 個

 

 

四,、操作步驟

1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

4號標準品 

150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

3號標準品 

150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

2號標準品 

150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

1號標準品 

150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

 

2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同),、標準孔,、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻。

3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。   

4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,如此重復5次,,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,,空白孔除外,。

7.溫育:操作同3。

8.洗滌:操作同5,。

9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色10分鐘.

10.終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

11.測定:以空白孔調(diào)零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

五,、試劑盒計算

以標準物的濃度為橫坐標,,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,,根據(jù)樣品的

OD 值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度,;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD 值計算出標

準曲線的直線回歸方程式,,將樣品的OD 值代入方程式,,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),,

即為樣品的實際濃度,。

 

六,、注意事項

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未

用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。

2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,,洗滌時不影響結(jié)果,。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,,以避免試驗誤差,。一次加樣時間

控制在5 分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣,。

4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔,。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值

大于標準品孔di一孔的OD 值),,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計

算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。

5.封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存,。

7.嚴格按照說明書的操作進行,,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。

9.本試劑不同批號組分不得混用,。

 

七.特別提醒

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,,提取后應(yīng)盡快進行實驗,。若不能

馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3 的樣品,,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

八.更多優(yōu)勢產(chǎn)品

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