詳細介紹
一、人丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1)ELISA定量試劑盒實驗詳細介紹
中文名稱:人丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1)ELISA定量試劑盒實驗
規(guī)格: 48T /96T
品牌:臻科生物
種屬:人ELISA試劑盒
檢測波長:450 nm
所需樣本體積: 50ul
適用范圍:僅供科研,,不得用于臨床診斷,。
保存及有效期:2-8℃,六個月
檢測樣本種類:用于測定血清,,血漿及相關液體等樣本的含量或者表達,。例如適合檢測包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、灌洗液,、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標本,。
臻科生物供應的種屬有:人、大鼠,、小鼠,、豚鼠、兔子,、昆蟲,、豬牛羊、雞鴨鵝,、植物ELISA試劑盒等
二,、實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1)水平。用純化的人丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1)抗體包被微孔板,,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1),,再與HRP 標記的丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色,。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1)呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中人丙酮酸脫氫酶E1(PDH E1)濃度,。
三,、試劑盒組成
1 | 30 倍濃縮洗滌液 | 20ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標準品(240 pmol/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
四、操作步驟
五,、試劑盒計算
以標準物的濃度為橫坐標,,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,,根據(jù)樣品的
OD 值由標準曲線查出相應的濃度,;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD 值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,,將樣品的OD 值代入方程式,,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),,
即為樣品的實際濃度,。
六、注意事項
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,,酶標包被板開封后如未
用完,,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,,并經(jīng)常校對其準確性,,以避免試驗誤差。一次加樣時間
控制在5 分鐘內(nèi),,如標本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,,做復孔,。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值
大于標準品孔*孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,,計
算時請Zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5),。
5. 封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存,。
7.嚴格按照說明書的操作進行,,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。
9.本試劑不同批號組分不得混用,。
七、特別提醒
1.標本采集后盡早進行提取,,提取按相關文獻進行,,提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,,可將標本放于-20℃保存,,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
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