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兔γ干擾素（IFN-γ）ELISA試劑盒廠家直供

本試劑盒用于體外定量檢測血清,、血漿,、組織勻漿及相關液體樣本中兔γ干擾素（IFN-γ）的含量,。

有效期：6個月

保存條件：2-8℃

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。往預先包被兔γ干擾素（IFN-γ）捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標本,、標準品、HRP標記的檢測抗體,，經過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,，并在酸的作用下轉化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的兔γ干擾素（IFN-γ）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計算樣品濃度,。

樣本處理和要求

1.  血清：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜，然后1000×g離心20 分鐘,，取上清即可,，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融,。
2.  血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,，并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測,，或將上清置于-20℃或-80℃保存,，但應避免反復凍融,。
3.  組織勻漿：用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果）,，稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調整,，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中,，于冰上充分研磨,。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎,，或反復凍融,。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測,。

4.  細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：請1000×g離心20分鐘,，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存,，但應避免反復凍融。

注：標本溶血會影響后檢測結果,，因此溶血標本不宜進行此項檢測,。

需要而未提到的試劑和器材

1. 酶標儀（450nm）
2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL,、20-200uL,、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
4. 蒸餾水或去離子水

試劑盒組成

備注：

1.  標準品濃度依次為：800、400,、200,、100、50,、25 pg/mL

2.  經過大量正常標本檢驗,，標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內，實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可,。當有部分樣本值超過大標準品濃度時,，可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。

注意事項

1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果,。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃,。使用后立即冷藏保存試劑。
2. 洗板不正確可以導致不準確的結果,。在加入底物前確保盡量吸干孔內液體,。溫育過程中不要讓微孔干燥掉,。
3. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值,。
4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,，已經變藍的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果,。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射,。