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綿羊白細(xì)胞介素1 β（IL-1β）酶聯(lián)免疫分析試劑盒說明書下載
閱讀：1061 發(fā)布時(shí)間：2018-7-14| 提 供 商 | 上海臻科生物科技有限公司 | 資料大小 | 149.7KB |
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綿羊白細(xì)胞介素1 β（IL-1β）酶聯(lián)免疫分析試劑盒說明書下載
使用目的：
本試劑盒用于測定綿羊血清,、血漿及相關(guān)液體樣本中白細(xì)胞介素 1β（IL-1β）含量,。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中綿羊白細(xì)胞介素 1β（IL-1β）水平。用純化的
綿羊白細(xì)胞介素 1β（IL-1β）抗體包被微孔板,，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次
加入白細(xì)胞介素 1β（IL-1β），再與 HRP 標(biāo)記的白細(xì)胞介素 1β（IL-1β）抗體結(jié)合,，形成
抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色,。TMB 在 HRP 酶的催化下
轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白細(xì)胞介素 1β
（IL-1β）呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算
樣品中綿羊白細(xì)胞介素 1β（IL-1β）濃度。
綿羊白細(xì)胞介素1 β（IL-1β）酶聯(lián)免疫分析試劑盒組成
1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 7 終止液 6ml×1 瓶
2 酶標(biāo)試劑 6ml×1 瓶 8 標(biāo)準(zhǔn)品（240 ng/L） 0.5ml×1 瓶
3 酶標(biāo)包被板 12 孔×8 條 9 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 1.5ml×1 瓶
4 樣品稀釋液 6ml×1 瓶 10 說明書 1 份
5 顯色劑 A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2 張
6 顯色劑 B 液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1 個(gè)
標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),，可將標(biāo)本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
綿羊白細(xì)胞介素1 β（IL-1β）酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
釋,。
120 ng/L 5 號標(biāo)準(zhǔn)品 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
60 ng/L 4 號標(biāo)準(zhǔn)品 150µl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
30 ng/L 3 號標(biāo)準(zhǔn)品 150µl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
15 ng/L 2 號標(biāo)準(zhǔn)品 150µl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
7.5 ng/L 1 號標(biāo)準(zhǔn)品 150µl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）,、標(biāo)準(zhǔn)孔,、
待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50µl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,，
然后再加待測樣品 10µl（樣品zui終稀釋度為 5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡
量不觸及孔壁,，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。
4. 配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置 30 秒后棄去，如此
重復(fù) 5 次,，拍干,。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl，空白孔除外,。
7. 溫育：操作同 3,。
8. 洗滌：操作同 5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl,，再加入顯色劑 B50µl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50µl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）,。 測定應(yīng)在加終止
液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。
操作程序總結(jié)：
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD 值為縱坐標(biāo),，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,，根據(jù)樣品的
OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù),；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 OD 值計(jì)算出標(biāo)
準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,，將樣品的 OD 值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度,，再乘以稀釋倍數(shù),，
即為樣品的實(shí)際濃度,。
綿羊白細(xì)胞介素1 β（IL-1β）酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項(xiàng)
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未
用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,，洗滌時(shí)不影響結(jié)果,。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,，以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時(shí)間zui好
控制在 5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣。
4． 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,，zui好做復(fù)孔,。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本 OD 值
大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的 OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n 倍）后再測定,，計(jì)
算時(shí)請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。
6．底物請避光保存,。
7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,，以英文說明書為準(zhǔn),。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃,。
2．有效期：6 個(gè)月