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人表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒實驗原理及實驗步驟

人表皮生長因子(EGF)elisa試劑盒實驗原理

植物纖維素酶試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）,。往預先包被人表皮生長因子(EGF)捕獲抗體的包被微孔中,，依次加入標本、標準品,、HRP標記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人表皮生長因子(EGF)呈正相關,。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值）,，計算樣品濃度,。

人表皮生長因子(EGF)elisa試劑盒操作步驟

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃,。

2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,；

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加,。

4.除空白孔外,，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL,，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL）,，靜置1min，甩去洗滌液,，吸水紙上拍干,，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）,。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,，37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值,。