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植物γ-氨基丁酸轉氨酶(GABAT)ELISA試劑盒需要注意的細節(jié)
閱讀:1340 發(fā)布時間:2019-10-12植物γ-氨基丁酸轉氨酶(GABAT)ELISA試劑盒需要注意的細節(jié)
細節(jié)一,、植物γ-氨基丁酸轉氨酶(GABAT)ELISA試劑盒樣本處理及要求
組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),,稱重后將組織剪碎,。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當調(diào)整,,并做好記錄,。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨,。為了進一步裂解組織細胞,,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融,。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,,取上清檢測。
細節(jié)二,、植物γ-氨基丁酸轉氨酶(GABAT)ELISA試劑盒注意事項
1.嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果,。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑,。
2. 洗板不正確可以導致不準確的結果,。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉,。
3. 消除板底殘留的液體和手指印,,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,,已經(jīng)變藍的底物液不能使用,。
5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射,。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上,。
8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性,。
9. 不能使用過期產(chǎn)品,。
10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置,。
11.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用。
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水,。