一、應(yīng)用背景
代謝組學是對生物體內(nèi)所有代謝物進行定性和定量分析,,并研究代謝物與生理病理變化的關(guān)系的一門學科,,在脂質(zhì)代謝物的研究中,血清樣本的預處理是一個關(guān)鍵步驟,。脂質(zhì)代謝物通常存在于復雜的生物環(huán)境中,,其濃度較低且易受干擾,因此需要對血清樣本進行精確的濃縮和純化,,以提高后續(xù)檢測的靈敏度和準確性,。
吉艾姆真空離心濃縮儀通過結(jié)合離心力,、低溫蒸發(fā)和加熱蒸發(fā)等方法,能夠快速有效地去除樣本中的溶劑,,實現(xiàn)樣本快速,、高效濃縮。
二,、實驗過程-脂質(zhì)代謝物樣品前處理
1,、樣品采集與制備
(1)用2ml規(guī)格離心管用移液器取50ul血清樣本,;
(2)加300ul甲醇(內(nèi)含標記物);
(3)加1ml二氯甲烷(提取脂質(zhì)代謝物),;
(4)加300ul純水(與甲醇互溶)后渦旋混勻
(5)放入離心機,,轉(zhuǎn)速14000rpm離心10分鐘,分層取下層清液800ul(液液萃?。?,放入1.5ml規(guī)格離心管
2,、樣品濃縮
實驗使用吉艾姆冷凍型Auto R1-Plus離心濃縮儀
(1)啟動離心濃縮儀
(2)打開冷阱開關(guān),按start鍵冷阱預冷
(3)設(shè)置主機預冷
(4)冷阱預冷20分鐘后將樣品放入離心腔,,設(shè)置溫度10℃,,轉(zhuǎn)速1500rpm,蒸干
3,、復溶
濃縮后的樣品復溶至50ul
4、質(zhì)譜分析
三,、濃縮效果
四,、實驗結(jié)論
在代謝組學研究中,選擇冷凍離心濃縮儀是較為理想的選擇,。代謝組學聚焦生物體內(nèi)小分子代謝物分析,,這些代謝物對溫度敏感。而冷凍離心濃縮儀的低溫環(huán)境可防止代謝物因高溫發(fā)生降解,、變性或揮發(fā),確保樣品完整性,。它能快速濃縮樣品,,提高代謝物濃度,為后續(xù)檢測分析提供高質(zhì)量樣本,,且高效的濃縮能力可提升實驗效率,,能更好地滿足代謝組學研究對樣品處理的嚴格要求。
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