生物顯微鏡
生物顯微鏡的分類
1. 按照定位級(jí)別分類,。可以分為學(xué)生級(jí),、實(shí)驗(yàn)級(jí),、研究級(jí)生物顯微鏡。
2. 按照目鏡的個(gè)數(shù)分類,。可以分為單目型,、雙目型,、三目型生物顯微鏡。
按照目鏡個(gè)數(shù)分類
3. 按目鏡和移動(dòng)臺(tái)的相對(duì)位置分類,??梢苑譃檎蒙镲@微鏡和倒置生物顯微鏡。正置(常規(guī))生物顯微鏡的物鏡在移動(dòng)臺(tái)的上方,,倒置生物顯微鏡的物鏡在移動(dòng)臺(tái)的下方,。
按照目鏡和移動(dòng)臺(tái)相對(duì)位置分類
4. 按成像原理分類??梢苑譃楣鈱W(xué)生物顯微鏡和電子生物顯微鏡,。
光學(xué)顯微鏡主要由目鏡、物鏡,、載物臺(tái)和反光鏡(集光鏡)組成,。目鏡和物鏡都是凸透鏡,焦距不同,。物鏡的凸透鏡焦距小于目鏡的凸透鏡的焦距,。物鏡相當(dāng)于投影儀的鏡頭,物體通過物鏡成倒立,、放大的實(shí)像,。目鏡相當(dāng)于普通的放大鏡,該實(shí)像又通過目鏡成正立,、放大的虛像,。經(jīng)顯微鏡到人眼的物體都成倒立放大的虛像。
顯微鏡的成像原理
電子顯微鏡是根據(jù)電子光學(xué)原理,,用電子束和電子透鏡代替光束和光學(xué)透鏡,,使物質(zhì)的細(xì)微結(jié)構(gòu)在非常高的放大倍數(shù)下成像,。由于電子束的波長遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于可見光的波長,所以即使電子束的錐角僅為光學(xué)顯微鏡的1%,,電子顯微鏡的分辨本領(lǐng)仍遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于光學(xué)顯微鏡,。光學(xué)顯微鏡的大放大倍率約為2000倍,而現(xiàn)代電子顯微鏡大放大倍率已經(jīng)超過了300萬倍 [1] ,。
電子顯微鏡
生物顯微鏡的基本結(jié)構(gòu)
生物纖維鏡的結(jié)構(gòu)
1. 鏡座,。位于顯微鏡底部,用于支持全鏡,。
2. 鏡臂,。位于鏡筒后面,通常為弓形,,用于支持鏡筒和搬移顯微鏡時(shí)握持部位,。
3. 鏡筒。位于顯微鏡上方,,上接目鏡,,下接物鏡轉(zhuǎn)換器。
4. 物鏡轉(zhuǎn)換器,。位于鏡筒下方的轉(zhuǎn)盤,,通常有3~4個(gè)圓孔,可裝配不同放大率的物鏡,,可使每個(gè)物鏡通過鏡筒與目鏡構(gòu)成一個(gè)放大系統(tǒng),。
5. 移動(dòng)臺(tái)。又名載物臺(tái),、工作臺(tái)或鏡臺(tái),,用于放置標(biāo)本。移動(dòng)臺(tái)上有兩個(gè)金屬壓片夾叫標(biāo)本夾,,用于固定玻片標(biāo)本,。有的載物臺(tái)上裝有推片器用來移動(dòng)標(biāo)本,有的載物臺(tái)本身可以移動(dòng),。
6. 調(diào)焦裝置,。為了得到清晰的圖像,必須調(diào)節(jié)物鏡與標(biāo)本之間的距離,,使物鏡的焦點(diǎn)對(duì)準(zhǔn)標(biāo)本,,這一操作叫調(diào)焦。調(diào)焦通過粗準(zhǔn)焦旋鈕和細(xì)準(zhǔn)焦旋鈕來實(shí)現(xiàn),。
7. 物鏡,。安裝在鏡筒下端的物鏡轉(zhuǎn)換器下方,因?yàn)樗拷灰曃矬w,,故又稱接物鏡,。物鏡是決定顯微鏡性能如分辨力的重要的構(gòu)件,。物鏡的作用是將標(biāo)本the first次放大成倒像。一臺(tái)顯微鏡備有數(shù)個(gè)物鏡,,每個(gè)物鏡由數(shù)片不同球面半徑的透鏡組成,。物鏡下端的透鏡口徑越小,鏡筒越長,,其放大倍數(shù)越高,;否則反之。物鏡有低倍物鏡和高倍物鏡,,其放大倍數(shù)一般刻在物鏡的鏡筒上,,例如4×、8×,、10×,、……、100×,,分別表示4倍,、8倍、10倍……,、100倍。其中40-65倍叫高倍物鏡,,90或100倍的稱為油浸物鏡,。
8. 目鏡。安裝在鏡筒上端,,因?yàn)樗拷^察者的眼睛,,又稱接目鏡。目鏡的作用是將由物鏡放大的實(shí)像進(jìn)一步放大成一個(gè)起立的虛像,,其作用相當(dāng)于一個(gè)放大鏡,。但它并不增加顯微鏡的分辨力。目鏡的視野內(nèi)有一條黑線,,叫做“指針”,,可以指示所觀察的部位。根據(jù)需要,,目鏡內(nèi)也可安裝測(cè)微尺,,用以測(cè)量所觀察物體的大小。一般顯微鏡備有幾個(gè)放大倍數(shù)不同的目鏡,,其放大倍數(shù)刻在目鏡邊框上,,如5×、10×,、15×等(顯微鏡的總放大倍數(shù)=物鏡放大倍數(shù)×目鏡放大倍數(shù)),。
9. 聚光鏡,。安裝在移動(dòng)臺(tái)下方支架上,主要由聚光鏡和孔徑光闌組成,。聚光鏡作用是會(huì)聚集光鏡的光線,,增加標(biāo)本的照明??讖焦怅@又稱光圈用來調(diào)節(jié)光線的強(qiáng)弱,。在孔徑光闌下面,通常還有一個(gè)圓形的濾光片架,,可根據(jù)鏡檢需要放置濾光片,。
10. 光源。通常安裝在顯微鏡的鏡座內(nèi)提供光源,。
生物顯微鏡的使用方法
1. 取用和放置,。從鏡箱中取出顯微鏡時(shí),必須一手握持鏡臂,,一手托住鏡座,,保持鏡身直立,切不可用一只手傾斜提攜,,防止摔落目鏡,。要輕取輕放,放時(shí)使鏡臂朝向自己,,距桌子邊沿5-10厘米處,。要求桌子平衡,桌面清潔,,避免直射陽光,。
2. 開啟光源。打開電源開關(guān),。
3. 放置玻片標(biāo)本,。將待鏡檢的玻片標(biāo)本放置在移動(dòng)臺(tái)上,使其中材料正對(duì)聚光鏡中央,。然后用彈簧壓片夾在玻片的兩端,,防止玻片標(biāo)本移動(dòng)。再通過調(diào)節(jié)玻片移動(dòng)器或調(diào)節(jié)移動(dòng)臺(tái),,將材料移至正對(duì)聚光鏡中央的位置,。
4. 低倍物鏡觀察。用顯微鏡觀察標(biāo)本時(shí),,應(yīng)先用低倍物鏡找到物像,。因?yàn)榈捅段镧R觀察范圍大,容易找到物像并定位到需作精細(xì)觀察的部位。方法為:
1) 轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦旋鈕,,用眼從側(cè)面觀望,,使鏡筒下降,直到低倍物鏡距標(biāo)本0.5厘米左右,。
2) 從目鏡中觀察,,用手慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦旋鈕,使鏡筒漸漸上升,,直到視野內(nèi)的物像清晰為止,。此后改用細(xì)準(zhǔn)焦旋鈕,稍加調(diào)節(jié)焦距,,使物像清晰,。
3) 微調(diào)移動(dòng)臺(tái)或玻片移動(dòng)器,找到欲觀察的部分,。要注意通常顯微鏡視野中的物像為倒像,,移動(dòng)玻片時(shí)應(yīng)向相反方向移動(dòng)。
5. 高倍倍觀察,。在低倍觀察基礎(chǔ)上,,若想增加放大倍數(shù),可進(jìn)行高倍觀察,。方法為:
1) 將欲觀察的部分,,移至低倍鏡視野正中央,物像要清晰,。
2) 旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器,,使高倍物鏡移到正確的位置上,隨后稍微調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦旋鈕,,即可使物像清晰。
3) 微調(diào)移動(dòng)臺(tái)或玻片移動(dòng)器,,定位欲仔細(xì)觀察的部位,。
注意:使用高倍物鏡時(shí),由于物鏡與標(biāo)本之間距離很近,,因此不能動(dòng)粗準(zhǔn)焦旋鈕,,只能用細(xì)準(zhǔn)焦旋鈕。
6. 換片,。觀察完畢,,如需換用另一玻片標(biāo)片時(shí),將物鏡轉(zhuǎn)回低倍,,取出玻片,,再換新片,稍加調(diào)焦,即可觀察,。不允許在高倍物鏡下?lián)Q片,,以防損壞鏡頭。
顯微鏡使用注意事項(xiàng)
1. 顯微鏡是精密儀器,,使用時(shí)必須按照操作規(guī)程,,做到細(xì)心和耐心,切勿操之過急,、動(dòng)作過猛,,以防操作失誤而損壞構(gòu)件 [2] 。
2. 不要用手觸摸光學(xué)玻璃部分,,同時(shí)防止劇烈碰撞而損壞構(gòu)件,。
3. 觀察時(shí)一定要加蓋玻片,不能讓玻片上的水流到移動(dòng)臺(tái)上,,更不能讓酸,、堿及其他化學(xué)藥品接觸顯微鏡,不能讓顯微鏡在陽光下曝曬,。
4. 使用細(xì)準(zhǔn)焦旋鈕時(shí),,如遇到不能繼續(xù)向同一方向轉(zhuǎn)動(dòng)而到達(dá)極*,不能蠻擰,,應(yīng)向相反方向退轉(zhuǎn),,并轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦旋鈕,然后再用細(xì)準(zhǔn)焦旋鈕進(jìn)行細(xì)調(diào),。
5. 目鏡或物鏡如有不潔時(shí),,要用專門的鏡紙作直線方向揩拭,切勿用手指或手帕及棉布涂擦,。目鏡或物鏡如沾有油污,,可先用專門的鏡紙沾少許二甲苯(或無水乙醇和Diethyl ether1∶1)擦拭干凈,再用干凈擦鏡紙揩拭一遍,。