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上海吉至生化科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品： 潮霉素b,DTT二硫蘇糖醇,Albumin BovineⅤ 牛血清白蛋白Ⅴ,Zeocin 博萊霉素 1.25ml -20℃ （125mg）,IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 進(jìn)口 100g |
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| 參考價(jià) | ￥ 268 |
| 訂貨量 | 1個(gè) |
更新時(shí)間：2024-01-16 16:14:13瀏覽次數(shù)：296
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| 供貨周期 | 一周 | 規(guī)格 | 100mg |
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| 貨號(hào) | P92300 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 綜合 |
蛋白酶k（Proteinase K）是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶,，用于生物樣品中蛋白質(zhì)的一般降解?？梢杂糜谙鞣N蛋白,。用于各種常見的分子生物學(xué),、細(xì)胞生物學(xué)等相關(guān)實(shí)驗(yàn)，例如基因組DNA抽提,、酶的消化去除等,。
酶活力，>30U/mg,。在37℃,，以血紅蛋白為底物，1分鐘內(nèi)可以產(chǎn)生相當(dāng)于1微摩爾酪氨酸Folin陽(yáng)性的氨基酸或多肽的蛋白酶K的量,，定義為一個(gè)單位蛋白酶K酶活力。
在很寬的pH范圍內(nèi)有效,，有效的pH范圍為pH4.0-12.5,，最佳pH范圍為pH7.5-8.0。
蛋白酶K的最佳反應(yīng)溫度為65℃,，但在65℃或更高的溫度蛋白酶K自身的也非常迅速地降解。很多時(shí)候反應(yīng)溫度選擇50-55℃,。
在0.2-1%SDS或約10mM尿素存在的情況下,，蛋白酶K顯示更高的酶活性。蛋白酶K的常用工作濃度為0.05-1mg/ml,，根據(jù)所用緩沖液是否含有SDS、尿素,、pH是否適合,、溫度是否適合等因素確定具體的工作濃度。
蛋白酶K跟蛋白酶有什么區(qū)別：
蛋白酶K廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué),藥理學(xué)等科研方面.一種非特異性,、枯草桿菌蛋白酶相關(guān)的絲氨酸蛋白酶,具有很高的比活性.一般儲(chǔ)存在-20°C,避光防潮密閉干燥。
蛋白酶是所有能夠催化分解蛋白質(zhì)的酶類的統(tǒng)稱,而蛋白酶K則是特指一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶,用于生物樣品中蛋白質(zhì)的降解,比如在提取DNA時(shí)溶解DNA的水中就有一定量的蛋白酶K.所以它們不屬于同一個(gè)產(chǎn)品,。
蛋白酶K配制標(biāo)準(zhǔn)：20mg/ml蛋白酶K配制標(biāo)準(zhǔn)(proteinase K)：將200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中,，輕輕搖動(dòng)，直至蛋白酶K*溶解,。不要渦旋混合。加水定容到10ml,，然后分裝成小份貯存于-20℃,。
蛋白酶K的保存：保存在-20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融,，有效保證12月,。
孵育溫度為55至65℃,，理想孵育溫度為58℃，孵育時(shí)間為15分鐘至48小時(shí);理想孵育時(shí)間為2小時(shí),。
作用：蛋白酶K在原位雜交技術(shù)中通常用于雜交前的處理,，它具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用,，以增加探針與靶核酸結(jié)合的機(jī)會(huì)，提高雜交信號(hào).但蛋白酶K的濃度過高,、消化時(shí)間過長(zhǎng)或孵育溫度過高時(shí),，都會(huì)對(duì)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)有一定的破壞，導(dǎo)致組織切片的脫落,，細(xì)胞核?的消失,，從而影響雜交結(jié)果。EDTA緩沖液可以替代蛋白酶K的作用,，解決上述出現(xiàn)的問題,，并能達(dá)到理想的染色效果。
